О состоянии клеточного иммунитета на фоне колхицинотерапии при периодической болезни у детей

Периодическая болезнь (ПБ), считающаяся аутосомно-рецессивно   наследуемой патологией, является актуальной проблемой в Армении, поскольку клиническая картина болезни весьма вариабельна, временами атипична, а процент осложнений в некоторых регионах продолжает быть высоким [12]. 

Существующие знания относительно патогенеза ПБ сводятся к механизмам иммунологического аутовоспаления, которое имеет периодически повторяющийся характер по причине уменьшения или отсутствия противовоспалительной функции мутированного пирина (кодируемого геном MEFV). 

Каскад развивающегося при ПБ аутовоспаления включает множество звеньев, таких как β2- адренергические рецепторы (класс TLRs), взаимодействие пирина с белками группы каспаз, NALP и другими белками – составными компонентами инфламмасом и участвующими в синтезе интерлейкина-1β, являющегося основным инициатором воспаления при ПБ [10, 11]. Само воспаление инициируется активацией почти всей системы иммунокомпетентных клеток, включая Т-лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы, что было доказано в ранних работах, посвященных изучению патогенеза ПБ [5]. 

Общеизвестно также, что единственным действенным препаратом, купирующим приступы заболевания по сей день остается колхицин, механизм действия которого еще не выяснен до конца [4]. 

Целью настоящего исследования было изучение влияния колхицинотерапии на показатели клеточного иммунитета при ПБ у детей в зависимости от пола больного, сроков манифестации заболевания, аллельного состояния выявленной мутации гена MEFV, наличия или отсутствия сопутствующей патологии желудочно-кишечного тракта.

Материал исследования. Выборка состояла из 25  детей, поступивших на обследование и лечение в РДКБ с предварительным диагнозом периодической болезни. Диагностика заболевания ставилась с  использованием  «Протокола обследования больного с подозрением на ПБ» и классифицировалась по В.А.Аствацатрян и Е.Х.Торосян [10]. У большинства больных диагностирована сопутствующая патология желудочно-кишечного тракта [18].

В дальнейшем все больные переведены на диспансерное наблюдение и находились на регулярной колхицинотерапии.  

Контрольную группу составили 13 практически здоровых детей.

Методы исследования включали полное клинико-лабораторное обследование больного на фоне колхицинотерапии с определением уровня Т-лимфоцитов крови.

Мононуклеарные клетки (МНК) получали центрифугированием гепаринизированной крови детей в градиенте плотности фикол-верографин. Для количественной оценки Т-лимфоцитов использовался тест спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) по M.Jondal et all [4]. Результаты исследований были обработаны методами вариационной статистики [3], достоверность разницы средних показателей определена по «t» критерию Стьюдента. 

Результаты исследований

Колхицинотерапия сопровождается статистически достоверным (р<0,05)  снижением уровня Т-лимфоцитов, причем у мальчиков обнаруживалась большая супрессия, чем у девочек. Гомозиготные больные характеризовались большей рефрактерностью к колхицинотерапии, поскольку уровень Т-лимфоцитов не менялся даже при условии длительного лечения, в то время как гетерозиготные больные были более чувствительны к лечению и характеризовались более гибкой системой клеточного иммунитета, так как показатели Т-клеток снижались (р<0,05) на фоне лечения  в сравнении с таковыми при приступе, межприступном периоде и показателями пратически здоровых детей. Аналогично вели себя Т-клетки в группе детей с ранней манифестацией заболевания (р<0,05). Наличие или отсутствие ЖКТ патологии не влияло на эффективность колхицинотерапии (р>0,05). 

Таблица 1.   Сравнительный уровень Т-лимфоцитов на фоне колхицинотерапии

Группы	Т-лимфоциты, %
Приступ	**56,1 + 2,6*, n=25
Межприступный период	**54,4 + 2.0*, n=12
Колхицинотерапия
Общая группа	**45,5 + 2.2*, n=25
Гомозиготы	51,1 + 2.4**, n=10
Гетерозиготы	45,4 + 2.5**, n=5
Мальчики	47,7 + 2.8, n=15
Девочки	42,2 + 3.4*, n=10
Ранняя манифестация	46,9 + 4.1, n=18
Поздняя манифестация	40,2 + 5.5*, n=6
С ЖКТ патологией	44,1 + 2.8, n=18
Без ЖКТ патологии	44,8 + 3.2, n=6
Контроль	55 + 1.8*, n=13

Примечание:

*- достоверная разница со здоровыми (контроль)

** - достоверная разница между группами ПБ

Заключение

Уровень Т-клеток  может служить индикатором эффективности колхицинотерапии, которая, как видно из полученных результатов, купирует приступы болезни  также через супрессию клеточного иммунитета. 

Более резистентными к колхицину, что отражается высокими показателями Т-клеток, оказываются гомозиготные больные и дети с ранней манифестацией заболевания. 

Литература

1. Аствацатрян В.А., Кцоян Л.А., Петросян Р.А., Клинические параллели нейро-иммунных взаимоотношений при периодической болезни у детей. Тезисы Х1 научно-практической конференции детских врачей г. Еревана, 17-18 октября 1995; 34. 
2. Аствацатрян В.А., Торосян Е.Х. Периодическая болезнь у детей. Ереван: Айастан; 1989. 249.
3. Бессмертный Б.С., Математическая статистика в клинической, профилактической и экспериментальной медицине. Москва: 1967.
4. Allen J.N., Herzyk D.J., Wewers M.D., Colchicine has opposite effects on Il-1b anf TNF alpha production. Current Opinion in Pharmacology, Vol.3, Issue 4, August 2003; 204.
5. Astvatzatryan V.A., Ktzoyan L.A., Petrosyan R.A. T-lymphocyte adrenoceptor succeptibility to salbutamol and the level of periferial T-lymphocytes in children with FMF. Familial  Mediterranean Fever. Second  International conference. 3 – 7 May, 2000;  Anthalya Turkey:  78.
6. Garcia-Marcos M., Perez-Andres E., Tandel S.,et all. Coupling of two pools of P2X7 receptors to distinct intracellular signaling pathways in rat submandibular gland. J. Lipid Res., April 1, 2006; 47(4): 705 - 714.
7. Jondal M., Holn Q., Wigzell H., J.Exp.Med, 1972; Vol.136: 207.
8. Inohara Naohiro, Takeyoshi Koseki, Lin Jungmei, del Peso Luis, Lucas Peter C at all An induced Proximity model for NF-kb  Activation in the Nod1/Rick and RIP Signaling Pathways// J.Biol.Chem., 2000; Vol.275, Issue 36, September 8, 27823-27831.
9. O’Connor W, Jonathan Jr., Harton A., Zhu Xinsheng, et all. Cutting Edge: CIASI/Cryopyrin/PYPAF1/NALP3/CATERPILLER 1.1 is an inducible Inflammatory Mediator with NF-kb Supressive properties//The Journal of Immunology, 2003; 171:6329-6333.
10. Reiter E. and Lefkowitz Robert.J GRKs and b-arestins: roles in receptor silencing, trafficking and signaling//Trends in Endocrinology and Metabilism, 2006; Vol.17, No4: 159-165.
11. Wittkowski H., Kallinich T., Keitzer R. et all D. The Damage Associated Molecular Pattern (DAMP) Molecules and TLR-4 ligands MRP8/14 in the pathogenesis of Familial Mediaterranean Fever//Clinical and Experimantal Rheumatology, The Fifth International Congress on Familial Mediterranean Fever And Systemic Autoinflammatoy Diseases, Rome, April 4-8, 26: 2008; 188.

Вопросы, ответы, комментарии