Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

Стоматология

Определение антимикробной активности препаратов, используемых в комплексном лечении больных пародонтитом

Определяли антимикробную активность препаратов Метрогил дента, Холисал и Солкосерил на сложной культуре микроорганизмов по разработанной методике. Выявлена степень выраженности антимикробного действия каждого ..
препарата.

 

Ключевые слова: антимикробная активность, Метрогил дента, Холисал, Солкосерил.

 

Актуальность проблемы  профилактики и лечения больных хроническим генерализованным пародонтитом обусловлена  не только значительным процентом распространения заболеваний пародонта  среди населения, но и, несомненно, недостаточным совершенством методов лечения данной  патологии.  Эффективность медикаментозного лечения недостаточна  вследствие низкой проникающей способности лекарственных агрегатов, что подтверждается  рецидивами и обострениями заболевания. Несовершенны методы  оценки  целенаправленной антимикробной  активности средств и препаратов. Что касается хирургических  методов,  то они тоже не всегда обеспечивают оптимальный эффект  [2—4, 8, 9].


Одним из путей повышения эффективности медикаментозного  лечения  является оптимальный выбор лекарственных препаратов. Однако на сегодняшний день методы определения антимикробной активности препаратов носят   во многом  субъективный характер вследствие  невозможности дифференцировать мертвые и живые микроорганизмы [1]. Избежать  этого можно,  применяя метод прямого  измерения интенсивности флюоресценции суспензий  клеток с препаратом  и без такового в корреляции со временем действия препарата.  В зависимости от принципа действия  препарата  (детергентного или  ингибирующего),  интенсивность флуоресценции должна возрастать или убывать во времени быстрее, чем без лекарственного   воздействия.  Это  и  будет  свидетельством   в пользу  антимикробной активности лекарственного препарата.


Целью работы было оценить  антимикробную активность препаратов Метрогил-дента, Холисал и Солкосерил на сложной культуре микроорганизмов. В задачи исследования  входило: выявить  активность  различных  препаратов  к  смешанной микрофлоре (микс  культуре  полости рта) с помощью  метода лазерной  флюоресценции. Провести сравнительную оценку антимикробной активности изучаемых препаратов  и антибиотиков.

 

Материал и методы

Метод лазерной  флюоресцентной диагностики основан на способности микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности флюоресцировать при облучении их лазером,  а также на варьируемости флюоресценции в зависимости  от особенностей микрофлоры и физикохимических  условий (например, при воздействии  на микрофлору  антибиотиков и антисептиков). Использовали новый экспресс-метод (ЛФД) для оценки  чувствительности микробов  к антибиотикам. Проведен  сравнительный анализ ЛФД с традиционными методами: оценена клиническая эффективность метода на сертифицированной медицинской аппаратуре.


Методика ЛФД исследования включала:

 

  • асептический забор исследуемого  материала в стерильные  пробирки (смешанные культуры микроорганизмов);
  • заполнение ими и исследуемыми препаратами планшеты  по стандарту (методом пограничных концентраций);
  • маркировку планшет  и инкубацию  исследуемого объекта при температуре 37±2˚С;
  • измерение интенсивности флюоресценции на сертифицированном аппарате Флюол для объектов с антимикробным препаратом (сразу, через 30 мин, через 1, 2 и, если необходимо, 24 ч), интерпретацию и сравнение результатов с исходными показателями контрольных образцов;
  •  установку   планшеты   после   каждого   измерения снова в термостат;
  • измерение для воспроизводимости результатов интенсивности флюоресценции контроля  (растворов  антимикробных  препаратов, материалов, в которых проводились исследования — пластик,  планшет);
  • интерпретацию результатов.


Все измерения выполнялись на планшетном флюориментре   Флюол  с  возможностью  измерять   интенсивность флюоресценции во времени. Дополнительно образцы исследовали  на непланшетном сертифицированном аппарате ЛФД с использованием кюветного варианта геометрии измерений. Образцы  смешивали  разными  способами с антимикробными препаратами. Для инкубации использовали питательные среды и агар. Операции  с приготовлением образцов суспензий проводили  в стационаре для микробиологических материалов.  Точность  концентраций веществ в образцах обеспечивалась с помощью автоматических  микропипеток.


Микробиологическое исследование эффективности антимикробных препаратов  проводили  диско диффузионным и градиентным способами, которые заключались в определении ширины  области  размножения микроорганизмов на поверхности  питательной среды с нанесенным на ее поверхность препаратом  [1, 6, 7].


Численную  оценку  антимикробной активности каждого препарата  производили пользуясь  правилом  вычисления скорости  экспоненциального затухания. Данное правило  широко  известно  и используется  в экспериментальной аналитике [5]. Для этой цели определяли  временную точку на экспериментальном графике по отдельному образцу. В данной точке соотношение разности  интенсивностей  флюоресценции в максимуме для данного графика,  интенсивности флуоресценции в искомой  и в начальной точках составляло ≈ 0,37.


(Фmax—Фx)/(Фmax—Ф0) ≈ 0,37, (1)


где Фmax   — интенсивность флюоресценции в максимуме, Фx  — интенсивность флюоресценции в искомой  временной точке x, Ф0 — интенсивность флюоресценции в начале измерения. Затем необходимо определить число (в виде дроби), обратное найденному, это и будет числовым критерием эффективности антимикробного препарата.

Результаты и обсуждение


Проведено два независимых эксперимента по отслеживанию индуцированной лазером флуоресценции суспензий микроорганизмов с добавлением разных антимикробных препаратов во времени. Характерный ход кривых совпал по каждому препарату в ходе эксперимента (см. рисунок). Как видно, на представленной на рисунке кривой динамики интенсивности флюоресценции чистой культуры без препарата, в начале происходит монотонное увеличение количества активных флюорофоров, а затем его медленный рост. Это свидетельствует о том, что живые клетки проявляют жизненную активность, происходит выработка флюоресцирующих ферментов и размножение микробных клеток. Однако для суспензии клеток с препаратами Метрогил дента, Солкосерил, Линкомицин и Гентамицин мы наблюдали рост интенсивности флуоресценции в начале наблюдения, а потом ее постепенное замедление до состояния постоянства. Данный факт означает уменьшение жизнедеятельности микробных клеток со временем  до полной  ее остановки, и,  следовательно, дезактивацию микробных  клеток и их гибель.


Другая картина наблюдается для препарата Холисал: вначале — постепенное ускорение  интенсивности флюоресценции, затем ее замедление. Это можно объяснить детергентным  действием препарата, т.е. растворением внутриклеточных флюорофоров во внешней  среде при разрушении оболочек  детергентом,  вследствие  чего происходит  рост интенсивности флюоресценции вначале,  а затем ее остановка из-за дефицита уцелевших клеток. Сами препараты  интенсивность флюоресценции не меняют с течением  времени  и флюоресцируют слабо по сравнению с культурой клеток.


При эксперименте с препаратом  Солкосерил наблюдается замедление скорости изменения интенсивности флуоресценции до 0 на протяжении часа экспозиции и постепенное увеличение  в дальнейшем. Такая картина может подтверждать отсутствие антимикробного действия препарата, но первоначальная шоковая реакция микроорганизмов  все же была зарегистрирована. Механизмы подобного поведения клеток пока неизвестны.


По времени установления статического  равновесия исследуемого параметра можно определить величину антимикробной активности препаратов:  чем меньше время, тем выше антимикробная активность.  По результатам экспериментов, антимикробная активность  исследуемых препаратов  выстраивается в следующий ряд: Метрогил дента, Холисал. Солкосерил не является антимикробным препаратом, но может в некоторой степени подавлять активность клеток. Остальные два антимикробных препарата, взятых  в качестве  контроля  (Гентамицин, Линкомицин),  демонстрируют   несколько большую  антимикробную активность, чего и следовало ожидать.


Пример расчета эффективности антимикробного действия препарата (Гентамицин).


Определяют точку x на шкале времени, для которой выполняется условие (1). Максимальная интенсивность Фmax=2,6, а Ф0=1,4. Исходя из формулы (1), Фx=2,15. Затем находим по уровню 2,15 значение точки x: оно равно 0,4 ч. Определяем эффективность, беря обратную дробь от этой величины: ε =2,5 ч–1. Таким образом, можно привести количественные значения для препаратов в порядке убывания их эффективности: Гентамицин — 2,5 ч–1, Линкомицин — 2 ч–1, Метрогил дента —1,7 ч–1, Холисал —1,25 ч–1.

Изменение  интенсивности флюоресценции смешанной культуры микрофлоры полости рта под воздействием антимикробных препаратов.


Исходя из полученных показателей, антимикробным препаратом,  предпочтительным в терапевтических целях  в стоматологии, является Метрогил дента.


Были  проведены  также микробиологические оценки наличия  антимикробного действия  препаратов. У всех препаратов, кроме Солкосерил зафиксировано подавляющее действие на рост микрофлоры.


Активность препаратов  для использования в пародонтологии  можно оценивать в процентах относительно активности Гентамицин. Она составит 68% для препарата Метрогил дента и 50% — для Холисал.


Таким образом, изученные препараты оказывают антимикробное действие на смешанную  культуру клеток, встречающихся у больных пародонтитом. Антимикробное действие препаратов убывает в следующем порядке (с указанием численного  критерия): Гентамицин — 2,5; Линкомицин — 2; Метрогил дента —1,7; Холисал —1,25. Солкосерил не оказывает  антимикробного действия,  но может частично  подавлять  жизнедеятельность микрофлоры. Объяснение этому факту пока не найдено.
 

ЛИТЕРАТУРА

  1. Александров М.Т. Лазерная клиническая биофотометрия. М 2008;267—296.
  2. Грудянов А.И., Калинин В.И., Орехова Л.Ю. и др. Организация пародонтологической помощи  в стоматологических учреждениях. В сб: Съезд   стоматологической  ассоциации   России,    6-й:   Труды.   М2000;194—197.
  3. Грудянов  А.И.,  Овчинникова В.В. Лечение  воспалительных заболеваний пародонта  препаратом  Метрогил дента.  В сб.: Новые медицинские технологии. Международная ассамблея,  3-я. М 2001;130—131.
  4. Грудянов  А.И., Овчинникова  В.В., Дмитриева  Н.А.    Антимикробная противовоспалительная   терапия    в   пародонтологии.   М:    МИА2004;80.

Автор. Проф. М.Т. АЛЕКСАНДРОВ, к.м.н. В.Ф. ПРИКУЛС1, В.Ю. БОГДАНОВ, Е.Н. ВАСИЛЬЕВ, Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Московский государственный медико-стоматологический университет
Источник. СТОМАТОЛОГИЯ 2, 2009
Спонсор электронной версии журнала.

МЕДА ФАРМАСЬЮТИКАЛС Швейцария,

Представительство в Армении

   
Администрация сайта med-practic.com не несет ответственности

за содержание информации
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Дентальные имплантаты MIS показали лучшие результаты с точки зрения критериев обработки и очистки поверхности имплантатов…..
Дентальные имплантаты MIS  показали лучшие результаты с точки зрения критериев обработки и очистки поверхности имплантатов…..

В новом номере журнала "EDI Journal" - март, 2015 г., было опубликовано новое исследование 65 поверхностей имплантатов 37 производителей имплантационных систем. Данное исследование было проведено независимыми...

Лечение Стоматология
Аспекты летальности среди детей по причине соматической патологии госпитализированных с разных медико-географических районов Республики Армения

Ключевые слова: летальность, дети, соматическая патология

Данные литературы относительно летальности среди детей по причине соматической патологии с разных медико-географических районов изобилуют сведениями, подтверждающими их определенное значение [2,4,5,7-11]...

Детские болезни Медицинский Вестник Эребуни 2.2012 (50)
Результаты изучения эпидемиологической ситуации стоматологических заболеваний у школьников региона Котайк Республики Армения

Ключевые слова: город, село, стоматологическая заболеваемость, эпидемиология

Мониторинг стоматологической заболеваемости населения является одной из важнейших задач системы здравоохранения [5,6,8]...

Медицинский Вестник Эребуни 1.2012 (49)
Хирургическое лечение обширных кист челюстей

Совершенствование методов лечения одонтогенных кист челюстей продолжает оставаться актуальной проблемой хирургической стоматологии. Это обусловлено широкой распространённостью заболевания...

Хирургия Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 3.2011
Распространенность и интенсивность основных стоматологических заболеваний у школьников административного округа Канакер – Зейтун города Еревана

Здоровье зубов и полости рта - одно из слагаемых общего здоровья и благополучия человека, залог его уверенности в себе, обеспечивающей адекватные взаимоотношения между людьми в современном обществе...

Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 3.2011
Эффективность стоматологического геля “xолисал”™ на микробный пейзаж зубо-десневой жидкости больных вирусными гепатитами

В последние годы все большую активность приобретает изучение проблемы сочетания заболеваний внутренних органов с патологическими процессами слизистой оболочки полости рта и пародонта [2,3,6]...

Инфекционные болезни Гастроэнтерология, гепатология Научно-медицинский журнал НИЗ 3.2011
Результаты применения кластерного анализа при исследовании гипсовых моделей челюстей

 

Ключевые слова: кластерный анализ, аномальное положение зубов 

Неправильное положение зубов относится к одной из наиболее распространенных аномалий зубочелюстной системы [1]. Оно встречается у 25-30% обследованных и у 38,7±2,6% взрослых...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2011 (46)
Применение эластичных подкладок при явлениях непереносимости акриловых зубных протезов

Одной из проблем, связанных с применением  частичных и полных  съемных акриловых протезов, является выбор показаний к протезированию у лиц, страдающих явлениями непереносимости акриловых базисных материалов...

Научно-медицинский журнал НИЗ 3.2011
Цефалометрическое исследование строения зубо-челюстной системы у пациентов с мезиальной окклюзией

Kлючевые слова: мезиальная окклюзия, телерентгенограммa

Мезиальная окклюзия зубных рядов у детей по частоте распространения занимает значительное место среди прочих зубо-челюстных аномалий. Это достаточно сложная аномалия по структуре морфологических и функциональных...

Медицинский Вестник Эребуни 1.2011 (45)
Состояние височно- нижнечелюстных суставов у пациентов с мезиальной окклюзией

Kлючевые слова: мезиальная окклюзия, височно-нижнечелюстнoй сустав 

Изучением морфологического состояния зубо-челюстной системы у пациентов с мезиальной окклюзией в различные возрастные периоды занимались многие авторы [1-14]...

Детские болезни Медицинский Вестник Эребуни 1.2011 (45)
Некоторые аспекты лечения гиперестезии зубов

Ключевые слова: гиперестезия, лечение

Проблема повышенной чувствительности зубов стала весьма актуальной в последнее время. Большое число исследований, посвященных гиперестезии проводится во многих странах...

Медицинский Вестник Эребуни 1.2011 (45)
Клиническая характеристика тканей пародонта у пациентов с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, ассоциированных с Н. pylori

Ключевые слова: Н. pylori, гингивит, пародонтит, гигиена полости рта

Заболевания органов пищеварения часто сопровождаются патологическими изменениями пародонтального комплекса. Ведущим фактором в формировании синтропии язвенной болезни...

Гастроэнтерология, гепатология Медицинский Вестник Эребуни 1.2011 (45)
Современное состояние судебной стоматологии как нового направления судебной медицины и его роль в идентификации личности (oбзор литературы)

Судебная стоматология - один из новых разделов судебной медицины, который имеет свои специфические особенности и требует познаний, выходящих за рамки судебно-медицинского образования...

Обзоры Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 4.2010
Экономические аспекты функционирования ортодонтической службы в Республике Армения

Ключевые слова: ортодонтия, прикус,  зубочелюстные  аномалии   

В исторической и научной литературе об основах ортодонтии существуют данные еще с начала прошлого века, когда в стоматологии начало формироваться новое научное направление...

Научно-медицинский журнал НИЗ 2.2010

Notice: Undefined index: HTTP_X_FORWARDED_FOR in /sites/med-practic.com/classes/flud_class.php on line 33

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ