Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

Системные заболевания

Влияние аллельного состояния гена mefv на b2-адренергическую чувствительность т-лимфоцитов периферической крови при периодической болезни у детей

Периодическая болезнь (ПБ) является наследственной патологией, ген (MEFV) которой локализован на коротком плече 16-й пары хромосом и детерминирует синтез белка с названием пирин, функция которого, по мнению многих исследователей,  заключается в подавлении воспаления. Современные знания относительно механизмов воздействия  пирина сводятся к доказательству его связи с нуклеарным (ядерным) фактором  и  регуляции посредством последнего синтеза провоспалительных цитокинов, к числу которых принадлежит интерлейкин-1β [5,9,10]. Мутации гена MEFV приводят к изменению структуры детерминируемого им пирина и возникновению ряда аутовоспалительных заболеваний, к числу которых относится также ПБ. 

 

Известно, что пирин тесно взаимодействует с внеклеточными и внутриклеточными факторами, такими как β2-адренергические рецепторы (класс TLRs), белками группы каспаз, NALP и другими белками, входящими в состав инфламмасом и участвующими в синтезе интерлейкина-1β, являющегося основным инициатором воспаления при ПБ [11,12]. Активность пирина отражается на активности этих структур, в частности, происходит интернализация или экстернализация TLRs с изменением их чувствительности к адренергическим агентам. 

 

Доказано, что механизмы воспаления включают участие всех типов иммунокомпетентных клеток, кооперацию системы макрофаг-лимфоцит и модулирующую роль симпато-адреналовой системы. Регулирующая функция последней осуществляется  через систему адренергических рецепторов, степень сенситизации которых  к адреномиметическим агентам имеет очень специфический характер при ряде заболеваний, включая ПБ, бронхиальную астму, аутоиммунные заболевания соединительной ткани [4].  

 

После открытия гена ПБ стал интересным поиск взаимосвязи и взаимодействия таких,  казалось бы, не связанных друг с другом, но параллельно вовлеченных в патогенез звеньев, как пирин и иммунная система.

 

Существует множество методов, определяющих степень сенситизации β2-адренергических рецепторов, к числу которых принадлежит описанный нами в более ранних работах метод инкубации Т-лимфоцитов с растворами адренергического агента различной молярности и последующей постановкой опыта Е-розеткообразования [1,4,6]. 

 

Целью настоящего исследования служило изучение влияния аллельного состояния гена ПБ на уровень Т-лимфоцитов периферической крови детей, страдающих ПБ, а также на  адренергическую чувствительность Т-лимфоцитов к селективному b2-адреномиметику – сальбутамолу.

 

Материалом исследования служила кровь 74 детей (в возрасте до 16 лет), поступивших на обследование и лечение в РДКБ с предварительным диагнозом периодической болезни. Диагноз ставился с  использованием  «Протокола обследования больного с подозрением на ПБ», болезнь классифицировалась по В.А.Аствацатрян и  Е.Х.Торосян [2]. 

 

В дальнейщем все больные переведены на диспансерное наблюдение и находились на регулярной колхицинотерапии.  

 

Контрольную группу составили 13 практически здоровых детей.

 

Методы исследования включали полное клинико-лабораторное обследование больного в приступе, межприступном периоде и на фоне колхицинотерапии с определением уровня Т-лимфоцитов и адренергической чувствительности к адреномиметику во всех фазах заболевания и на фоне лечения. 

 

В качестве адреномиметика использовали салбутамол в концентрациях 10-5М и 10-9М. 

 

Мононуклеарные клетки (МНК) получали центрифугированием гепаринизированной крови детей в градиенте плотности фикол-верографин.

 

Для оценки влияния b2-адреномиметика на Е-розеткообразование лимфоциты в количестве 2•106 кл/мл инкубировали с испытуемым препаратом 15 минут, отмывали и ставили реакцию спонтанного розеткообразования. В качестве контроля к МНК добавляли эквивалентное количество среды 199. Для количественной оценки Т-лимфоцитов использовался тест спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) по M.Jondal et all [8]. Результаты исследований были обработаны методами вариационной статистики [3], достоверность разницы средних показателей определена по t-критерию Стьюдента. 

 

Результаты исследований


Для оценки уровня Т-лимфоцитов в зависимости от аллельного состояния гена MEFV, больные были разделены на подгруппы в соответствии с обнаруженными мутациями MEFV на гомозигот и гетерозигот. Как показали результаты исследований, уровень Т-клеток в приступе болезни не отличается в подгруппах (р>0,05) как и по сравнению с контролем (р>0,05).  

 

Уровень Т-лимфоцитов у гомо- и гетерозигот в межприступном периоде не отличался от такового в периоде приступа и показателей здоровых детей (контроль).    

 

Межприступный период не сопровождается изменениями количества Т-лимфоцитов в сравнении с периодом приступа и контрольными показателями. На фоне колхицинотерапии происходит достоверное снижение Т-лимфоцитов в сравнении с показателями приступа (р<0,05) и контроля (р<0,05) как в группе гомозигот, так и гетерозигот (таблица 1). Колхицинотерапия у гетерозигот приводит к выраженной иммуносупрессии как в сравнении с гомозиготами, так и контрольными показателями (р<0,05). 

 

 

Таблица 1  Взаимосвязь между аллельным состоянием MEFV и  уровнем Т-лимфоцитов периферической крови детей с ПБ в разные фазы болезни


Группы

Содержание Т-лимфоцитов, %

Приступ

Межприступный

Колхицин

Гомозиготы

54.1±4.2*, n=9

51.1±2.1, n=8

**51.1±2.6*,  n=10

Гетерозиготы

57.3±2.4*, n=13

54.1±2.6, n=11

**45±2.9****,    n=6

Контроль

55±1.8 , n=13

55±1.8, n=13

55±1.8  ***, n=13

Примечание: *- достоверная разница внутри подгруппы

                   ** - достоверная разница между группами

                   *** - достоверная разница с контролем

 

В группе больных старше 6,5 лет был проведен сравнительный анализ влияния аллельного состояния гена MEFV на b2-адренергическую чувствительность Т-лимфоцитов (таблица 2). Оказалось, что салбутамол в обеих испытуемых дозах влиял на Е-розеткообразование Т-лимфоцитов в подгруппе гомозигот как в приступе болезни, так и межприступном периоде, а в дозе 10-5М на фоне колхицинотерапии (р<0,05). В подгруппе гетерозигот влияния салбутамола на Е-розеткообразование отсутствовало (р>0,05). 

 

 

Таблица 2  Сравнительный анализ влияния аллельного состояния MEFV на адренергическую чувствительность Т-лимфоцитов к сальбутамолу


Подгруппы

 

 

Группы

Содержание Т-лимфоцитов после инкубации

Без препарата

С препаратом

10-5М

10-9М

Гомо -

зиготы

Приступ

***68 + 2.9*, n=17

57,3 + 2.6*, n=12

56.6 + 4.2**, n=12

Межприступный

52 + 2.5***, n=7

***41 + 4.5*,n=7

***36,3 + 2,2*, n=7

Колхицин

***44.2 + 4.1*, n=5

***28.8 + 9.1* , n=5

***46 + 2.4, n=5

Гетеро-

зиготы

Приступ

59.4 + 2.4**, n=14

***60.7 ± 3.2, n=9

***63.9 ± 2.1, n=9

Межприступный

54.8 + 3.8, n=8

58 + 5, n=5

54 + 9.4, n=5

Колхицин

***46 + 2.4, n=6

46.8 + 5.7, n=6

***46.5 + 2.9, n=6

Контроль

***55±1.8, n=13

Примечание: *    - достоверная разница внутри подгруппы

                   **    - достоверная разница между группами

                   *** - достоверная разница с контролем

 

Заключение


Полученные данные свидетельствуют о взаимосвязи клеточного звена иммунитета, а также его адренергической части, с мутациями MEFV в патогенезе периодической болезни, о влиянии аллельного состояния MEFV на функцию адренергических рецепторов Т-лимфоцитов.

 

Литература 


  1. Аствацатрян В.А., Кцоян Л.А., Петросян Р.А., Клинические параллели нейро-иммунных взаимоотношений при периодической болезни у детей//Тезисы Х1 научно-практической конференции детских врачей г. Еревана, 17-18 октября 1995г. С. 34. 
  2. Аствацатрян В.А., Торосян Е.Х. Периодическая болезнь у детей//Ереван, «Айастан», 1989,-249с.
  3. Бессмертный Б.С., Математическая статистика в клинической, профилактической и экспериментальной медицине, Москва, 1967.
  4. Петросян Р.А. Взаимосвязь состояния 2-адренорецепторов и содержания Т-лимфоцитов при периодической болезни у детей//Дисс. Канд. Ереван 1997, 159с.
  5. Allen J.N., Herzyk D.J., Wewers M.D., Colchicine has opposite effects on Il-1b anf TNF alpha production//Current Opinion in Pharmacology, Vol.3, Issue 4, Augusts 2003, p 204.
  6. Astvatzatryan V.A., Ktzoyan L.A., Petrosyan R.A. T – lymphocyte adrenoceptor succeptibility to salbutamol and the level of periferial T – lymphocytes in children with FMF. Familial  Mediterranean Fever. Second  International conference. 3 – 7 may, 2000, Anthalya, Turkey, р. 78.
  7. Garcia-Marcos M., Perez-Andres E., Tandel S.,et all. Coupling of two pools of P2X7 receptors to distinct intracellular signaling pathways in rat submandibular gland//J. Lipid Res., April 1, 2006; 47(4): 705 - 714. 
  8. Jondal M., Holm G., Wigzell H. Surface markers on human T- and B-lymphocytes.1.A large population of lymphocytes forming nonimmune rоssettese with sheep red blood cells//J. Exp.Med., 1972., No.136.,P207-215.
  9. Inohara Naohiro, Takeyoshi Koseki, Lin Jungmei, del Peso Luis, Lucas Peter C at all An induced Proximity model for NF-kb Activation in the Nod1/Rick and RIP Signaling Pathways// J.Biol.Chem., 2000, Vol.275, Issue 36, September 8, 27823-27831.
  10. O’Connor W, Jonathan Jr., Harton A., Zhu Xinsheng, et all. Cutting Edge: CIASI/Cryopyrin/PYPAF1/NALP3/CATERPILLER 1.1 is an inducible Inflammatory Mediator with NF- Supressive properties//The Journal of Immunology, 2003, 171:6329-6333.
  11. Reiter E. and Lefkowitz Robert.J GRKs and -arestins: roles in receptor silencing, trafficking and signaling//Trends in Endocrinology and Metabilism, 2006, Vol.17, No4, p.159-165
  12. Wittkowski H., Kallinich T., Keitzer R. et all D. The Damage Associated Molecular Pattern (DAMP) Molecules and TLR-4 ligands MRP8/14 in the pathogenesis of Familial Mediaterranean Fever//Clinical and Experimantal Rheumatology, The Fifth International Congress on Familial Mediterranean Fever And Systemic Autoinflammatoy Diseases, Rome, April 4-8, 26: 2008, p.188.

 

 

Автор. Р.А.Петросян, Диспансерный кабинет г. Мартуни, РА
Источник. Научно-медицинский журнал НИЗ 1,2010
Информация. med-practic.com
Авторские права на статью (при отметке другого источника - электронной версии) принадлежат сайту www.med-practic.com
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Особенности продукции растворимого рецептора ИЛ-2(sIL-2R) при периодической болезни

Ключевые слова: периодическая болезнь, цитокины, растворимый рецептор ИЛ-2, аутовос-палительные заболевания

Периодическая болезнь (ПБ), или семейная средиземноморская лихорадка (Familial Mediter-ranean Fever FMF; MIM 249 100), – наследственное аутовоспалительное системное заболевание с аутосомно-рецессивным типом наследования и определенной этнической предрасположенностью [12]...

Терапия Медицинский Вестник Эребуни 2.2012 (50)
Сочетание ревматизма с изолированной артериальной гипертонией у пожилых пациентов

Изолированная систолическая артериальная гипертензия (ИСАГ) – повышение систолического АД (САД) больше 140 мм рт. ст. при нормальном или несколько сниженном диастолическом АД (ДАД) – нижнее 90 мм рт. ст...

Кардиология, ангиология Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 3.2011
Исследование факторов, ассоциированных с эффективностью и развитием побочных эффектов метотрексата при ревматоидном артрите и серонегативных спондилоартропатиях

Ключевые слова: метотрексат, ревматоидный артрит, токсичность, гомоцистеин

Введение. Системные заболевания соединительной ткани и хронические воспалительные заболевания суставов имеют высокую распространенность и являются одной из ведущих причин ранней инвалидизации во всем мире...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2011 (46)
Факторы риска АА-амилоидоза у больных периодической болезнью

Ключевые слова: периодическая болезнь, АА-амилоидоз, ген MEFV, белок SAA

Периодическая болезнь (ПБ) – наследственное заболевание, проявляющееся рецидивирующим асептическим доброкачественным серозитом и лихорадкой. Амилоидоз почек относится к наиболее серьезным...

Медицинский Вестник Эребуни 1.2011 (45) Нефрология
Факторы риска АА-амилоидоза у больных периодической болезнью

Ключевые слова: периодическая болезнь, АА-амилоидоз, ген MEFV, белок SAA

Периодическая болезнь (ПБ) – наследственное заболевание, проявляющееся рецидивирующим асептическим доброкачественным серозитом и лихорадкой. Амилоидоз почек относится к наиболее серьезным...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2010 (42) Нефрология
Клинико-генетические параллели колхицинотерапии у детей, страдающих периодической болезнью

Известно, что по сей день единственным эффективным препаратом, используемым для лечения периодической болезни  (ПБ) остается колхицин. Однако до сих пор нет полноценного объяснения механизма воздействия препарата при данном...

Детские болезни Научно-медицинский журнал НИЗ 1,2010
Клинико-генетическая характеристика спаечной кишечной непроходимости при периодической болезни у детей

Ключевые слова: периодическая болезнь, дети, спаечная кишечная непроходимость, клинико-генетические особенности 

Периодическая болезнь (ПБ), или семейная средиземноморская лихорадка (Familial Medirerranean Fever, FMF; ОMIM 249100), моногенное аутосомно-рецессивно наследуемое генетическое заболевание воспалительной природы...

Детские болезни Медицинская наука Армении 4.2009
Роль некоторых факторов воспаления в патогенезе периодической болезни

Ключевые слова: интерлейкины, острофазовый ответ, альдостерон, катехоламины, этиохоланолон, воспаление, оксидантный стресс

Периодическая болезнь (ПБ) – наследственное аутовоспалительное заболевание с аутосомно-рецессивным типом наследования...

Медицинская наука Армении 3.2009
Влияние некоторых социально-биологических факторов на раннюю манифестацию периодической болезни у детей в Армении

Ключевые слова: периодическая болезнь, дети, факторы риска ранней манифестации, пол, масса тела при рождении, возраст родителей, длительность грудного вскармливания, генетические и внешнесредовые модифицирующие факторы

Аутосомно-рецессивно наследуемая периодическая болезнь (ПБ), или семейная средиземноморская лихорадка (Familial Medirerranean Fever, FMF; ОMIM 249100)...

Детские болезни Медицинская наука Армении 3.2009
Течение хронического антрального гастрита у больных периодической болезнью

Периодическая болезнь (ПБ) наследственное за­бо­ле­ва­ни­е, которое характеризуется сопровождающимися лихорадкой и воспалением се­роз­ных оболочек повторяющимися приступами [15]. В настоящее время болезнь рас­сматривают в рамках наследственных аутовоспалительных болезней [12]...

Гастроэнтерология, гепатология Научно-медицинский журнал НИЗ 3,2009 Терапия
Течение язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у больных периодической болезнью

Периодическая болезнь (ПБ) – наследственное заболевание, которое характерезуется сопровождающимися лихорадкой и воспалением серозных оболочек повторяющимися приступами [15]. В настоящее время болезнь рассматривают в рамках наследственных аутовоспалительных болезней [12]...

Гастроэнтерология, гепатология Научно-медицинский журнал НИЗ 3,2009
Роль альдостерона в патогенезе воспалительного процесса периодической болезни, роль альдостерона в патогенезе воспалительного процесса периодической болезни

Периодическая болезнь (ПБ) – генетически предрасположенное аутоиммунное воспалительное заболевание, в развитии которого наряду с генетическими факторами [1,2,6,10,28] важную роль играют и фенотипические факторы, а патогенез ее...

Научно-медицинский журнал НИЗ 2,2009
Сочетание периодической болезни и системных аутовоспалительных заболеваний

Ключевые слова: периодическая болезнь, васкулит, болезнь Бехчета, серонегативный спондилоартрит

Периодическая болезнь (ПБ), или семейная средиземноморская лихорадка, - аутосомно-рецес­сивное заболевание, распространенное в популяциях...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2009 (38)
Применение метотрексата в ревматологии: поиск факторов, ассоциированных с токсичностью

Ключевые слова: метотрексат, ревматоидный артрит, токсичность, гомоцистеин

Рациональная фармакотерапия системных забо­леваний соединительной ткани продол­жа­ет оставаться одной из наиболее сложных проб­лем современной клинической медицины. Этио­логия многих болезней неизвестна, что затрудняет...

Методы лечения Медицинский Вестник Эребуни 2.2009 (38)

Notice: Undefined index: HTTP_X_FORWARDED_FOR in /sites/med-practic.com/classes/flud_class.php on line 33

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ