Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

Гематология

Взаимосвязь между нарушениями системы гемостаза и липидными, белковыми компонентами тромбоцитарных мембран при гемофилии

 Ключевые слова: гемофилия, тромбоциты, фосфоинозитиды, АТФазы, фосфолипаза А2

В ряду наследственно обусловленных тромбоцитопатий гемофилия занимает одно из важнейших мест, вследствие большого риска инвалидизации пациентов, а также высокой детской и юношеской смертности. Гемофилия является врожденным заболеванием, проявляющимся у лиц мужского пола геморрагическим синдромом гематомного типа. Прогноз в отношении выздоровления неблагоприятный и зависит от степени тяжести заболевания, своевременности и адекватности терапии [1, 7].

 

По современным представлениям гемофилия связана с низким содержанием, количественной и качественной недостаточностью какого-либо одного из факторов свёртывания крови. Этот дефицит вызван мутациями гена фактора свертывания крови.

 

 По недостаточности определенного фактора различают следующие основные типы гемофилии: А (дефицит VIII фактора – фVIII), В (дефицит IX фактора – фIX) и С (дефицит XI фактора – фXI). Гемофилия А встречается чаще, чем гемофилия Б, и составляет 80-85% всех случаев гемофилии. Гемофилия наследуется по рецессивному признаку, сцепленному с половой Х хромосомой, при этом наследуются один и тот же тип гемофилии и одинаковая тяжесть заболевания. В общей популяции больных гемофилией  30-40% случаев приходится на спорадическую гемофилию, которая обусловлена случайной патологической мутацией гена. 

 

Исходя из ключевой роли тромбоцитов в процессах свертывания крови целью данного исследования явилось изучение взаимосвязи между нарушениями гемостаза и изменениями липидных, белковых компонентов тромбоцитарных мембран при гемофилии. 

 

Материал и методы

 

Исследования проводились в мембранах тромбоцитов 32 пациентов с гемофилией А. Контролем служила кровь 30 практически здоровых (без нарушений гемостаза) лиц. Для оценки состояния коагуляционного звена гемостаза использовали общепринятые клинические тесты: активированное парциальное тромбопластиновое время, количественное определение фактора VIII, протромбиновый индекс, тромбиновое время, концентрацию фибриногена на аппарате ’’STAGO ST-4’’. По содержанию фактора VIII пациенты условно были разделены на 2 группы: с высоким (5% и более) и низким (менее 5%) содержанием фактора VIII (I и II группы). 

 

Тромбоциты выделяли по модифицированному методу McCarty O.J. et al. [4]. Фракционирование полифосфоинозитидов осуществляли методом тонкослойной хроматографии на закрепленном слое силикагеля марки ЛС 5/40 (Чехия), в системе растворителей хлороформ:метанол:аммиак (45:35:10) [6].

 

В тромбоцитарных мембранах определение активности Na/K-АТФазы проводили по модифицированному методу Xie Z.J.  et al. [10], а Са-АТФазы – по Dean W.L. [2], основанным на регистрации прироста неорганического фосфора в среде в ходе АТФазной реакции. Активность ферментов выражали в мкг неорганического фосфора на мг белка. Оптическую плотность измеряли на СФ-46 при длине волны 700 нм. Статистическая обработка данных производилась с использованием критерия достоверности и различий Стьюдента.

 

Результаты и обсуждение

 

В результате проведенных исследований в тромбоцитах крови обеих групп выявлено существенное нарушение метаболизма фосфоинозитидов (ФИ) (рис.1). Полученные данные свидетельствoвали о количественных и качественных сдвигах в спектре полифосфоинозитидов при гемофилии А в группах пациентов с разным содержанием фактора VIII. 

 

Рис.1. Изменение относительного содержания (в % от суммы) полифосфоинозитидов тромбоцитарных мембран при гемофилии разной степени тяжести

 

Так, у пациентов первой группы с высоким содержанием фактора VIII и сравнительно легким течением заболевания наблюдается повышение относительного содержания трифосфоинозитидов (ТФИ), при одновременном снижении уровня дифосфоинозитидов (ДФИ) и монофосфоинозитидов (МФИ). У пациентов второй группы эта закономерность усиливается, при этом уровень ДФИ снижается в 1.6 раза, а содержание ТФИ повышается в 1.7 раза. 

 

Особый интерес представляли исследования особенностей изменения величин коэффициентов соотношений полифосфоинозитидов. По нашим данным (таблица), как легкое, так и тяжелое течение гемофилии А характеризуется значительным изменением всех изученных показателей.

 

Таблица 

Изменение коэффициентов соотношений полифосфоинозитидов тромбоцитов крови пациентов с гемофилией А разной степени тяжести

У пациентов из первой группы наблюдалось статистически достоверное повышение коэффициентов соотношений ТФИ/ДФИ и ТФИ/МФИ, при этом значение коэффициента ДФИ/МФИ остается в пределах контрольных величин. Тяжелое течение заболевания, отмечаемое у пациентов второй группы приводит к резкому, почти двукратному, снижению коэффициентов соотношений ТФИ/ДФИ и ТФИ/МФИ, при одновременном повышении коэффициента ДФИ/МФИ. Полученные результаты свидетельствуют о нарушении метаболизма изученных компонентов фосфоинозитидного цикла, что проявляется значительным изменением липид-липидных соотношений в мембранах тромбоцитов при изученных состояниях организма. 

 

По данным ряда авторов [1, 8, 9], нарушение деятельности ФИ-сигнальной системы стимулируется изменением содержания тромбина, запускает каскад реакций арахидоновой кислоты, фосфорилирование ряда белков, мобилизует Са2+ в клеточном пространстве и изменяет транспортные процессы.

 

Это подтверждается также исследованием деятельности транспортных АТФаз и фосфолипазы А2 (ФЛА2). Согласно полученным данным (рис.2), у пациентов обеих групп наблюдается активация  Na/K- и Са-АТФаз, свидетельствующая о нарушении в условиях патологии транспорта Na+, K+ и Са2+

Рис.2. Активность транспортных АТФаз и ФЛА2 в тромбоцитах крови при гемофилии разной степени тяжести

 

Зарегистрированное нами снижение уровня ДФИ, стимулированное факторами активации тромбоцитов, и  мобилизация Са2+ в цитоплазме способствуют вторичной активации тромбоцитов, ресинтезу ТФИ (что также выявлено нами), нарушению процессов окислительного фосфорилирования [1, 3, 5, 8].

 

Повышение активности ФЛА2 указывает на интенсификацию в этих условиях процессов гидролиза мембранных фосфолипидов и запуск реакции арахидонового каскада, и вследствие этого повреждение биомембран.

 

Эти закономерности наиболее четко прослеживаются в группе пациентов с тяжелой степенью тяжести заболевания, свидетельствуя о глубоких деструктивных процессах тромбоцитарных мембран у этой категории больных. 

 

Литература

 

  1. Berridge M.J., Lipp P., Bootman M.D. The versatility and universality of calcium signalling.  Nat. Rev. Mol. Cell. Biol., 2000, 1, p.11–21.
  2. Dean W.L., Chen D., Brandt P.C., Vanaman T.C. Regulation of platelet plasma membrane Ca2+-ATPase by cAMP-dependent and tyrosine phosphorylation. J. Biol. Chem., 1997, 272, p.15113-15119.
  3. Downes C.P., Gray A., Lucocq J.M. Probing phosphoinositide functions in signalling and membrane trafficking. Trends Cell. Biol., 2005, v.15, p.259–268.
  4. McCarty O. J., Zhao Y.S. et al. Evaluation of the role of platelet integrins in fibronectin-dependent spreading and adhesion. J. Thromb. Haemost., 2004, 2, p.1823–1833.
  5. Pendaries C., Tronchere H., Plantavid M., Payrastre B. Phosphoinositide signaling disorders in human diseases. FEBS Lett., 2003, 546, p. 25–31.
  6. Pettitt T. R., Dove S.K. et al. Analysis of intact phosphoinositides in biological samples. Journal of Lipid Research, 2006, v. 47, p. 1588-1596.  
  7. Reding M.T., Wu. H. et. al. Sensitization of CD4+ T cells to coagualation factor VIII: response in congenital and acquired hemophilia patients and in healthy subjects. Thromb. Haemost., 2000, 84, p. 643-652.
  8. Simonsen A., Wurmser A.E., Emr S.D., Stenmark H. The role of phosphoinositides in membrane transport. Curr. Opin. Cell Biol., 2001, v.13, p.485–492.
  9. Strehler E.E., Zacharias D.A. Role of alternative splicing in generating isoform diversity among plasma membrane calcium pumps.  Physiol. Rev., 2001, v.81, p.21–50.
  10. Xie Z.J., Wang Y.H. et. al.  Determination of total (Na+,K+)-ATPase activity of isolated or cultured cells. Anal. Biochem., 1989, 183, p.215-219.     

Автор. В.М. Саргсян Гематологический центр им. проф. Р.О.Еоляна МЗ РА 0014, Ереван, ул. Г. Нерсесяна, 7 УДК 612.015
Источник. Медицинская наука Армении 4.2009
Информация. med-practic.com
Авторские права на статью (при отметке другого источника - электронной версии) принадлежат сайту www.med-practic.com
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Показатели заболеваемости гемофилией в Республике Армения

Ключевые слова: гемофилия, показатели, гемокоагуляция

Гемофилия относится к наследственным коагулопатиям, связанным с дефицитом плазменных факторов свертывания и объединяет два основных дефекта гемокоагуляции...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2010 (42)
Структурно-функциональные особенности вновь синтезированных тирозинпроизводных соединений антикоагулянтного действия

Ключевые слова:  свертываемость крови, тромбопластическая активность, синтетические соединения Н-30, Н-31, Н-32, адреналин, изопропилтирозин

Развитие гематологических исследований существенным образом оттенялось особым вниманием, подчеркивающим необходимость проведения широкомасштабных фундаментальных работ по выявлению...

Медицинская наука Армении 1.2009
Генетические маркеры крови при анкилозирующем спондилите и синдроме Рейтера в популяции армян (Клиническая медицина)

Ключевые слова:  HLА антигены, эритроцитарные антигены, анкилозирующий спондилит, синдром Рейтера          

Анкилозирующий спондилит (АС) и синдром Рейтера (СР) являются основными представителями группы серонегативных спондилоартропатий. Эти родственные заболевания объединяют высокая степень семейной агрегации и тесная связь с антигеном HLА-В27...

Медицинская наука Армении 4.2007
Возможности ранней диагностики поражения легких при лейкозах

Ключевые слова: диагностика, пневмония, плевриты, бронхиты, нейтропения

В последние годы все большее внимание исследователей сосредоточено на создание программ, направленных на прогнозирование, своевременную диагностику и профилактику лейкозов и их осложнений...

Медицинская наука Армении 4.2007
Different patterns of redistribution of monocytes, granulocytes and lymphocytes between bone marrow and peripheral blood induced by hypothalamic proline-rich polypeptide (Теоретическая медицина)

Keywords: hypothalamic proline-rich polypeptide (PRP), bone marrow, peripheral blood, lymphocytes, granulocytes, macrophages, flow cytometry 

A number of novel polypeptides have been discovered and isolated from the neurosecretory granules of bovine and human neurohypophysis [7]...

Медицинская наука Армении 3.2007
Синдром гиперлейкоцитоза как неотложное состояние в детской онкогематологии

Ключевые слова:   гиперлейкоцитоз, лейкемия, синдром лизиса опухоли, “белые” тромбы, лейкостаз, метаболизм, реология крови, сладжирование, синдром системного воспалительного ответа, полиорганная недостаточность

Современная детская онкогематология достигла значительных успехов. Излечение от этих грозных заболеваний достигло 60-70%. Однако у части больных детей первичные клинические проявления заболевания начинаются внезапно синдромами...

Детские болезни Медицинская наука Армении 3.2007
Ацилирование липидов арахидоновой кислотой и образование липидных вторичных посредников в анти-CD3/CD28 костимулированных лимфоцитах в норме и при различных формах лейкемии (Клиническая медицина)

Ключевые слова: фосфолипиды, нейтральные липиды, арахидоновая кислота, лимфоциты, костимуляция, липидные вторичные посредники, лейкозы

Выяснение вопросов этиологии, патогенеза и терапии злокачественных новообразований и по сей день является одной из наиболее актуальных проблем современной фундаментальной науки и клинической медицины...

Статьи разное Медицинская наука Армении 2.2007
Значимость некоторых биохимических показателей в диагностике легочных осложнений при лимфопролиферативных заболеваниях

Ключевые слова: лимфопролиферативные заболевания, легочные осложнения, фосфолипиды, адениловые нуклеотиды, транспортные АТФазы...

Дыхательная система Медицинская наука Армении 2.2007
Изменение структурно-функциональной организации мембран лимфоцитов крови при лимфогранулематозе

Ключевые слова: лимфогранулематоз, 5´-нуклеотидаза, Mg- и Ca-АТФазы, фосфолипиды

Исследование показателей структурно-функ­циональных характеристик биоло­ги­чес­ких мембран является информативным в оценке состояния функциональной активности клеток организма при различных...

Медицинский Вестник Эребуни 3.2007 (31)
Некоторые аспекты профилактики и лечения ожоговой анемии

Ключевые слова: ожоговая анемия, трехвалентное железо, Феррум Лек

Анемия является серьезным осложнением ожоговой болезни, которое усугубляет состояние обожженных, замедляет течение репаративно-регенеративных процессов и ухудшает прогноз [1]. В патогенезе ожоговой анемии (ОА) есть ряд вопросов, порождающих дискуссии и противоречия в выборе путей профилактики и лечения [3]...

Травматология и ортопедия Медицинский Вестник Эребуни 1-4.2006 (25-28)

Notice: Undefined index: HTTP_X_FORWARDED_FOR in /sites/med-practic.com/classes/flud_class.php on line 33

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ