Взаимосвязь морфологических и химических показателей обтурата дентинных канальцев при экспериментальном использовании различных гипосенситивных средств

Введение

Одной из актуальных проблем современной стоматологии является проблема гиперчувствительности зубов (дентина). В последнее время наблюдается рост распространенности гиперчувствительности зубов, что обычно связывается не только с непрерывным увеличением заболеваний органов и тканей полости рта, приводящих к появлению данного явления, но и с увеличением продолжительности жизни с сохранением зубов в пожилом возрасте [6,10]. В настоящее время частота встречаемости гиперчувствительности дентина колеблется от 8 до 57 процентов [2,3,5,7], что подтверждает положение о том, что несмотря на множество современных разработок, до сих пор отсутствуют методы эффективного лечения этой патологии. Исследования различных морфологических и функциональных характеристик образовавшейся минеральной массы в дентинных канальцах под влиянием гипосенситивных средств обычно проводятся в условиях in vitro, с использованием разных рецептов искусственной слюны и специально приготовленных дентинных дисков из зубов различных животных, а также методов визуальной оценки данного субстрата и рентгеновского микроанализа его химического состава [1,8]. В этом отношении нужно отметить о практически незаменимом значении сканирующей электронной микроскопии дентина, которая позволяет наглядно провести оценку факта обтурирования канальцев, степени и глубины этого процесса, с проведением определенных морфометрических исследований. Как отмечают D.Gillam и соавт. [4], определение морфологических характеристик поверхности дентина и ее проницаемости являются адекватными методами скрининга для оценки влияния потенциальных гипосенситивных средств.

Материал и методы

Нами была поставлена цель - изучить взаимосвязь морфологических и химических показателей обтурата дентинных канальцев при экспериментальном использовании различных гипосенситивных средств. Исследования проводились на 48 зубах лабораторных крыс (24 животных). В качестве гипо- сенситивного средства использованы аммония гек- сафторсиликат (АмГФС) - группа 2, гексафторсиликат глутаминовой кислоты (ГлГФС) - группа 3, лизина (ЛизГФС) - группа 4, пролина (ПрГФС) - группа 5,и Про-Аргин технология - группа 6, а одна группа животных (группа 1) служила контролем (без нанесения гипосенситива). Данные соединения аминокислот получены авторами настоящего сообщения (Petrosyan A., et al. 2011).

Ход эксперимента: под внутрибрюшинным нембуталовым наркозом, в области шейки вестибу-лярной поверхности нижних зубов шаровидным ал-мазным бором создавали небольшое углубление (с проникновением в дентин), производили протрав-ливание данного участка в течение 1 мин, затем по-верхность промывали, высушивали и наносили ис-пытуемое вещество. После четырехкратного проведения данной манипуляции (нанесение вещества), животных выводили из опыта, при этом, во избежание эфтаназии животных, в условиях уже описанного наркоза, проводили срезание обработанных зубов на уровне шейки сепарационными дисками, а корневую пульпу коагулировали. Срезанные образцы зубов (поперечные срезы) маркировали и в течение 1-ой недели консервировали в пробирках с 10%-ным формалином. Изучение образцов проводили с помощью сканирующей электронной микроскопии и методом энергодисперссионного рентгеновского микроанализа, с целью которых использованы сканирующий электронный микроскоп (SEM) VEGA TS 5130MM (ускоряющее напряжение: 20кВ; ток зонда: 10^100пА; вакуум: 5x10-5 тор) и микроаналитическая система INCA Energy 300 (детектор - кремний с окном SATW, детектирование всех элементов, начиная с бора; угол выхода рентгеновского излучения 45^о; энергия электронного зонда: 20 кэВ). Для этого поверхности образцов металлизированы для снятия зарядов углеродом методом вакуумного напыления. Образцы приклеены серебряной пастой к алюминиевому держателю и установлены внутрь вакуумной камеры микроскопа. Изображения были получены для определения морфологии поверхности образца, а также для проведения морфометрических исследований. При этом, глубину формирования обтурата в дентинной трубочке измеряли в двух точках: в участках наибольшего и наименьшего его проникновения, а затем вычисляли среднюю величину для каждого образца (учитывали только трубочки, заполненные обтуратом). Процент обтурированных канальцев считали в поле зрения, в котором как правило наблю-дались 14-17 канальцев (при увеличении в х2000). Для локализации областей анализа были использованы изображения во вторичных электронах (SE). В каждом образце анализ проведен в трех точках - на обработанной поверхности, в середине обтурационной массы и в стенке дентинной трубочки.

Результаты и обсуждение

Результаты проведенного корреляционного ана-лиза по группам между морфологическими и химическими показателями представлены в таблицах 1-6.

Таблица 1. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата в контрольной группе

Примечание: глуб. — глубина формирования обтурата, поверх. — процент обтурированных канальцев на поверхности

Таблица  2. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата при использовании аммония гексафторсиликата

Таблица 3. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата при использовании гексафторсиликата глутаминовой кислоты

Таблица 4. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата при использовании гексафторсиликата лизина

Таблица 5. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата при использовании гексафторсиликата пролина

Таблица 6. Величина коэффициента корреляции между морфологическими и химическими показателями обтурата при использовании Про-Аргин технологии

В первую очередь нужно отметить то, что, как и ожидалось, величина коэффициента корреляции между двумя морфологическими показателями во всех группах находилась в диапазоне сильной положительной корреляции (>0,7), с наиболее высокими его значениями в группе использования гексафторсиликата глутаминовой кислоты (0,898), а ниже показателей контрольных значений отмечены в группах гек- сафторсиликата аммония и пролина. Если брать за основу контрольную группу исследования, где фор-мирование обтурата и обогащение минералами про-исходили спонтанно, то было бы логичным провести параллели между соответствующими показателями корреляции не только между группами использования гипосенситива, но также, прежде всего именно с контролем. При этом, при анализе связей между мор-фологией и элементным составом на поверхности и в обтурате основное внимание было сконцентрировано на изучение связи между глубиной формирования обтурата и количеством обтурированных канальцев с одной стороны, и проникновением кальция и фосфора в данные участки - с другой. Проведенный корреляционный анализ выявил следующие законо-мерности: в целом, между морфологическими и хи-мическими показателями обтуратов в группах выявлены сильные корреляции (как положительные, так и отрицательные), что свидетельствует о значительной роли таких химических элементов, как кальций и фосфор в процессе формирования дентинного обтурата; в отношении отличий между величинами ко-эффициента корреляций в группах нужно отметить, что в принципе указанные отличия не имеют суще-ственного значения, за исключением случаев корре-ляции между количеством фосфора на поверхности и морфологическими показателями в группе исполь-зования аммония гексафторсиликата, а также между количеством кальция на поверхности и теми же мор-фологическими показателями в группе использования Про-Аргин технологии.

С учетом поставленного нами предусловия о

 Диаграмма 1.

взятии за основу принципиальных показателей кон-трольной группы исследования, нужно отметить, что в этом плане наиболее близкие к контролю тенденции выявляются в группе использования гексаф- торсиликата глутаминовой кислоты. Об этом свиде-тельствуют также данные регрессионного анализа величин глубины формирования обтурата и процента обтурированных канальцев на поверхности в зависимости от содержания кальция на поверхности зуба и в самом обтурате (табл. 7).

Таблица 7. Результаты регрессионного анализа зависимостей между морфологическими и химическими показателями в группах

Примечания: ГФО — глубина формирования обтурата, ПОК — процент обтурированных канальцев, ККП — количество кальция на поверхности, ККО — количество кальция в обтурате.

Диаграмма 2.

Так, оказалось, что при спонтанном течении формирования обтурата при условии увеличения содержания кальция в обтурате на 1 единицу, в свою очередь, глубина формирования обтурата увеличится на 1,15 микрон, а в группе гексафторсиликата глутаминовойкислоты -1,16. Кроме того, зависимость процента обтурированных канальцев от содержания кальция в обтурате также имеет примерно такую же картину в отмеченных группах (соответственно 0,48 и 0,46). Для большей наглядности указанные тенденции представим в виде диаграмм (1 и 2).

Таким образом, проведенные нами исследования по изучению взаимосвязей морфологических и химических показателей обтурата дентинных канальцев при экспериментальном использовании различных гипосенситивных средств показали, что, среди всей группы апробированных гипосенситивных средств, ныне используемых в клинических условиях или находящихся на стадии экспериментальной разработки, применение гексафторсиликата глутаминовой кислоты обеспечивает наиболее близкие тенденции к естественному процессу формирования дентинного обтурата, но с более выраженными количественными и качественными показателями этого процесса, что несомненно имеет большое значение в плане стойкости сформировавшегося обтурата к различным воздействиям.

Список литературы

1. Absi E., Addy M., Adams D. J. Clin. Periodontol., 1989,16,(3), 190-195.
2. Dababneh R., KhouriA., Addy M. Dentine hypersensitivity- an enigma? a review of terminology, epidemiology, mechanisms, aetiology and management. Brit. Dent. J., 1999, 187, 11, 606-611.
3. Gillam D., Mordan N., Newman H. Adv. Dent. Res., 1997,11,(4), 487-501.
4. Gillam D., Tang J., Mordan N., Newman H. J. Oral Rehabil., 2002, 29, (4), 305-313.
5. Irwin C., McCusker P. J. Irish. Dent. Assoc., 1997, 43, 7-9.
6. Krauser J. Hypersensitive teeth. Part II: Treatment. J. Prosthet. Dent., 1986, 56, (3), 307-311.
7. Liu H., Lan W., Hsieh C.. Prevalence and distribuation of cervical dentine hypersensitivity in a population in Taipei, Taiwan. J. Endodont., 1998, 24, 45-47.
8. Mollica F., Travassos A., Torres C., de Moraes M., Balsamo M. Gen. Dent., 2008, 56, (5), 424-430.
9. Petrosyan A., Ghazaryan V, Fleck M., Harutyunyan A., Andriasyan L., Brsikyan N., Hexafluorosilicates of amino acids having anti-caries activity. Armenian patent application #AM20110068 (priority: 03.06.2011, positive decision: 20.07.2011).
10. West N.. Dentine hypersensitivity. Monogr. Oral Sci., 2006, 20, 173-189.

Вопросы, ответы, комментарии