Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

Фармакология

Определение антимикробной активности препаратов, используемых в комплексном лечении больных пародонтитом

Определяли антимикробную активность препаратов Метрогил дента, Холисал и Солкосерил на сложной культуре микроорганизмов по разработанной методике. Выявлена степень выраженности антимикробного действия каждого ..
препарата.

 

Ключевые слова: антимикробная активность, Метрогил дента, Холисал, Солкосерил.

 

Актуальность проблемы  профилактики и лечения больных хроническим генерализованным пародонтитом обусловлена  не только значительным процентом распространения заболеваний пародонта  среди населения, но и, несомненно, недостаточным совершенством методов лечения данной  патологии.  Эффективность медикаментозного лечения недостаточна  вследствие низкой проникающей способности лекарственных агрегатов, что подтверждается  рецидивами и обострениями заболевания. Несовершенны методы  оценки  целенаправленной антимикробной  активности средств и препаратов. Что касается хирургических  методов,  то они тоже не всегда обеспечивают оптимальный эффект  [2—4, 8, 9].


Одним из путей повышения эффективности медикаментозного  лечения  является оптимальный выбор лекарственных препаратов. Однако на сегодняшний день методы определения антимикробной активности препаратов носят   во многом  субъективный характер вследствие  невозможности дифференцировать мертвые и живые микроорганизмы [1]. Избежать  этого можно,  применяя метод прямого  измерения интенсивности флюоресценции суспензий  клеток с препаратом  и без такового в корреляции со временем действия препарата.  В зависимости от принципа действия  препарата  (детергентного или  ингибирующего),  интенсивность флуоресценции должна возрастать или убывать во времени быстрее, чем без лекарственного   воздействия.  Это  и  будет  свидетельством   в пользу  антимикробной активности лекарственного препарата.


Целью работы было оценить  антимикробную активность препаратов Метрогил-дента, Холисал и Солкосерил на сложной культуре микроорганизмов. В задачи исследования  входило: выявить  активность  различных  препаратов  к  смешанной микрофлоре (микс  культуре  полости рта) с помощью  метода лазерной  флюоресценции. Провести сравнительную оценку антимикробной активности изучаемых препаратов  и антибиотиков.

 

Материал и методы

Метод лазерной  флюоресцентной диагностики основан на способности микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности флюоресцировать при облучении их лазером,  а также на варьируемости флюоресценции в зависимости  от особенностей микрофлоры и физикохимических  условий (например, при воздействии  на микрофлору  антибиотиков и антисептиков). Использовали новый экспресс-метод (ЛФД) для оценки  чувствительности микробов  к антибиотикам. Проведен  сравнительный анализ ЛФД с традиционными методами: оценена клиническая эффективность метода на сертифицированной медицинской аппаратуре.


Методика ЛФД исследования включала:

 

  • асептический забор исследуемого  материала в стерильные  пробирки (смешанные культуры микроорганизмов);
  • заполнение ими и исследуемыми препаратами планшеты  по стандарту (методом пограничных концентраций);
  • маркировку планшет  и инкубацию  исследуемого объекта при температуре 37±2˚С;
  • измерение интенсивности флюоресценции на сертифицированном аппарате Флюол для объектов с антимикробным препаратом (сразу, через 30 мин, через 1, 2 и, если необходимо, 24 ч), интерпретацию и сравнение результатов с исходными показателями контрольных образцов;
  •  установку   планшеты   после   каждого   измерения снова в термостат;
  • измерение для воспроизводимости результатов интенсивности флюоресценции контроля  (растворов  антимикробных  препаратов, материалов, в которых проводились исследования — пластик,  планшет);
  • интерпретацию результатов.


Все измерения выполнялись на планшетном флюориментре   Флюол  с  возможностью  измерять   интенсивность флюоресценции во времени. Дополнительно образцы исследовали  на непланшетном сертифицированном аппарате ЛФД с использованием кюветного варианта геометрии измерений. Образцы  смешивали  разными  способами с антимикробными препаратами. Для инкубации использовали питательные среды и агар. Операции  с приготовлением образцов суспензий проводили  в стационаре для микробиологических материалов.  Точность  концентраций веществ в образцах обеспечивалась с помощью автоматических  микропипеток.


Микробиологическое исследование эффективности антимикробных препаратов  проводили  диско диффузионным и градиентным способами, которые заключались в определении ширины  области  размножения микроорганизмов на поверхности  питательной среды с нанесенным на ее поверхность препаратом  [1, 6, 7].


Численную  оценку  антимикробной активности каждого препарата  производили пользуясь  правилом  вычисления скорости  экспоненциального затухания. Данное правило  широко  известно  и используется  в экспериментальной аналитике [5]. Для этой цели определяли  временную точку на экспериментальном графике по отдельному образцу. В данной точке соотношение разности  интенсивностей  флюоресценции в максимуме для данного графика,  интенсивности флуоресценции в искомой  и в начальной точках составляло ≈ 0,37.


(Фmax—Фx)/(Фmax—Ф0) ≈ 0,37, (1)


где Фmax   — интенсивность флюоресценции в максимуме, Фx  — интенсивность флюоресценции в искомой  временной точке x, Ф0 — интенсивность флюоресценции в начале измерения. Затем необходимо определить число (в виде дроби), обратное найденному, это и будет числовым критерием эффективности антимикробного препарата.

Результаты и обсуждение


Проведено два независимых эксперимента по отслеживанию индуцированной лазером флуоресценции суспензий микроорганизмов с добавлением разных антимикробных препаратов во времени. Характерный ход кривых совпал по каждому препарату в ходе эксперимента (см. рисунок). Как видно, на представленной на рисунке кривой динамики интенсивности флюоресценции чистой культуры без препарата, в начале происходит монотонное увеличение количества активных флюорофоров, а затем его медленный рост. Это свидетельствует о том, что живые клетки проявляют жизненную активность, происходит выработка флюоресцирующих ферментов и размножение микробных клеток. Однако для суспензии клеток с препаратами Метрогил дента, Солкосерил, Линкомицин и Гентамицин мы наблюдали рост интенсивности флуоресценции в начале наблюдения, а потом ее постепенное замедление до состояния постоянства. Данный факт означает уменьшение жизнедеятельности микробных клеток со временем  до полной  ее остановки, и,  следовательно, дезактивацию микробных  клеток и их гибель.


Другая картина наблюдается для препарата Холисал: вначале — постепенное ускорение  интенсивности флюоресценции, затем ее замедление. Это можно объяснить детергентным  действием препарата, т.е. растворением внутриклеточных флюорофоров во внешней  среде при разрушении оболочек  детергентом,  вследствие  чего происходит  рост интенсивности флюоресценции вначале,  а затем ее остановка из-за дефицита уцелевших клеток. Сами препараты  интенсивность флюоресценции не меняют с течением  времени  и флюоресцируют слабо по сравнению с культурой клеток.


При эксперименте с препаратом  Солкосерил наблюдается замедление скорости изменения интенсивности флуоресценции до 0 на протяжении часа экспозиции и постепенное увеличение  в дальнейшем. Такая картина может подтверждать отсутствие антимикробного действия препарата, но первоначальная шоковая реакция микроорганизмов  все же была зарегистрирована. Механизмы подобного поведения клеток пока неизвестны.


По времени установления статического  равновесия исследуемого параметра можно определить величину антимикробной активности препаратов:  чем меньше время, тем выше антимикробная активность.  По результатам экспериментов, антимикробная активность  исследуемых препаратов  выстраивается в следующий ряд: Метрогил дента, Холисал. Солкосерил не является антимикробным препаратом, но может в некоторой степени подавлять активность клеток. Остальные два антимикробных препарата, взятых  в качестве  контроля  (Гентамицин, Линкомицин),  демонстрируют   несколько большую  антимикробную активность, чего и следовало ожидать.


Пример расчета эффективности антимикробного действия препарата (Гентамицин).


Определяют точку x на шкале времени, для которой выполняется условие (1). Максимальная интенсивность Фmax=2,6, а Ф0=1,4. Исходя из формулы (1), Фx=2,15. Затем находим по уровню 2,15 значение точки x: оно равно 0,4 ч. Определяем эффективность, беря обратную дробь от этой величины: ε =2,5 ч–1. Таким образом, можно привести количественные значения для препаратов в порядке убывания их эффективности: Гентамицин — 2,5 ч–1, Линкомицин — 2 ч–1, Метрогил дента —1,7 ч–1, Холисал —1,25 ч–1.

Изменение  интенсивности флюоресценции смешанной культуры микрофлоры полости рта под воздействием антимикробных препаратов.


Исходя из полученных показателей, антимикробным препаратом,  предпочтительным в терапевтических целях  в стоматологии, является Метрогил дента.


Были  проведены  также микробиологические оценки наличия  антимикробного действия  препаратов. У всех препаратов, кроме Солкосерил зафиксировано подавляющее действие на рост микрофлоры.


Активность препаратов  для использования в пародонтологии  можно оценивать в процентах относительно активности Гентамицин. Она составит 68% для препарата Метрогил дента и 50% — для Холисал.


Таким образом, изученные препараты оказывают антимикробное действие на смешанную  культуру клеток, встречающихся у больных пародонтитом. Антимикробное действие препаратов убывает в следующем порядке (с указанием численного  критерия): Гентамицин — 2,5; Линкомицин — 2; Метрогил дента —1,7; Холисал —1,25. Солкосерил не оказывает  антимикробного действия,  но может частично  подавлять  жизнедеятельность микрофлоры. Объяснение этому факту пока не найдено.
 

ЛИТЕРАТУРА

  1. Александров М.Т. Лазерная клиническая биофотометрия. М 2008;267—296.
  2. Грудянов А.И., Калинин В.И., Орехова Л.Ю. и др. Организация пародонтологической помощи  в стоматологических учреждениях. В сб: Съезд   стоматологической  ассоциации   России,    6-й:   Труды.   М2000;194—197.
  3. Грудянов  А.И.,  Овчинникова В.В. Лечение  воспалительных заболеваний пародонта  препаратом  Метрогил дента.  В сб.: Новые медицинские технологии. Международная ассамблея,  3-я. М 2001;130—131.
  4. Грудянов  А.И., Овчинникова  В.В., Дмитриева  Н.А.    Антимикробная противовоспалительная   терапия    в   пародонтологии.   М:    МИА2004;80.

Автор. Проф. М.Т. АЛЕКСАНДРОВ, к.м.н. В.Ф. ПРИКУЛС1, В.Ю. БОГДАНОВ, Е.Н. ВАСИЛЬЕВ, Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Московский государственный медико-стоматологический университет
Источник. СТОМАТОЛОГИЯ 2, 2009
Спонсор электронной версии журнала.

МЕДА ФАРМАСЬЮТИКАЛС Швейцария,

Представительство в Армении

   
Администрация сайта med-practic.com не несет ответственности

за содержание информации
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Коллагеносодержащие препараты в дерматологии и эстетической медицине
Коллагеносодержащие препараты в дерматологии и эстетической медицине

Проблема возрастных изменений кожи и восстановления ее целостности после перенесенных заболеваний и травм будет актуальной всегда. Накоплен большой мировой опыт использования коллагенсодержащих препаратов...

Дерматология
Лечение аллергического ринита: возможности топических антигистаминных препаратов

В условиях надвигающегося пика аллергического сезона необходимо остановиться на наиболее распространенной и актуальной в этот период патологии – аллергическом рините (АР). АР – заболевание, возникающее...

ЛОР болезни Детские болезни Аллергология Терапия
Препараты комплексного метаболического действия в терапевтической практике

Анализ частоты назначений различных лекарственных средств в Украине в последние годы демонстрирует уверенную тенденцию к лидерству так называемых метаболических препаратов, то есть средств...

Терапия
Эффективная стратегия лечения синдрома диабетической стопы

Синдром диабетической стопы (СДС) является одним из наиболее серьезных и высокозатратных в терапии осложнений сахарного диабета (СД), которое развивается на фоне диабетической полинейропатии (ДПН)...

Эндокринология Методы лечения
Корректор тканевого метаболизма солкосерил в лечении диабетических осложнений

Солкосерил, являясь препаратом, воздействующим на энергетический метаболизм тканей и нормализующим утилизацию глюкозы клетками, оказывает благоприятное воздействие при лечении макро- и микрососудистых осложнений сахарного диабета...

Эндокринология
Стрепсилс Интенсив —новый подход к симптоматическому лечению боли в горле
Стрепсилс Интенсив —новый подход к симптоматическому лечению боли в горле

В современном мире боль в горле (БГ) является одним из наиболее частых поводов обращения населения в аптеки для приобретения препаратов быстрого симптоматического действия...

Детские болезни ЛОР заболевания Терапия Дыхательная система
Трансфер фактор в комплексной терапии бронхиальной астмы средней степени тяжести

Бронхиальная астма (БА) является одним из наиболее распространенных хронических заболеваний, представляющих серьезную проблему, как для детей, так и для взрослых. По данным ВОЗ, опубликованным в январе 2000г 100-150 млн...

Аллергология Терапия Дыхательная система
ТРАНСФЕР ФАКТОР. Клинические исследования

Исследования показали клиническую эффективность данных препаратов при применении их в лечебных целях в составе комплексной терапии больных ВИЧ-инфекцией, описторхозом, гепатитами В и С, остеомиелите, генитальном герпесе...

Логопедическая терапия в системе нейрореабилитации

Ключевые слова: нейрореабилитация, афазия, логопедия, восстановление речи, логопедическая терапия, органические поражения головного мозга

В двадцатых годах прошлого столетия в медицине сформировалась концепция реабилитации...

Медицинский Вестник Эребуни 2.2012 (50)
Определение ампициллина в лекарственных препаратах основными красителями различных классов экстракционно-спектрофотометрическим методом

Антибиотики – химическое соединение биологического происхождения. Для определения микрограммовых количеств ампициллина (натриевая соль) ранее нами были применены основные красители различных классов оксази – нильский синий “Б” [1], диазинового – сафранин “Т” [2], и акридинового рядов, акридиновый желтый [3]...

Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 2.2012
Сравнительная характеристика экстракционно-фотометрического определения бензилпенициллина в лекарственных препаратах тиазиновыми красителями

Для определения микрограммовых количеств бензилпенициллина (натриевая соль) в лекарственных препаратах ранее нами были применены различные представители основных красителей тиазинового ряда: тетраметилтионин – метиленовый голубой (МГ) [1]...

Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 2.2012
Экстракционно-фотометрическое определение бензилпенициллина тиазиновым красителем толуидиновым голубым

Ранее для экстракционно  фотометрического  определения микрограммовых количеств бензилпенициллина нами были разработаны новые методики представителями тиазиного ряда тетраметлтиониномТетраМТН...

Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 2.2011
Экстракционно-спектрофотометрическое определение оксациллина с родаминовым красителем - родамином 6Ж

Родаминовые или ксантеновые красители представляют другой ряд основных органических красителей. Представителями этого ряда красителей являются этил-родамин, бутил-родамин, родамин С...

Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 4.2010
Применение индинола и эпигаллата при аденомиозе

Аденомиоз является одним из наиболее распространенных заболеваний, занимая в структуре гинекологической патологии третье место после воспалительных заболеваний и миомы матки. По данным ряд авторов...

Перинатология, акушерство и гинекология Методы лечения Вестник Хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна 3.2010

Notice: Undefined index: HTTP_X_FORWARDED_FOR in /sites/med-practic.com/classes/flud_class.php on line 33

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ