Экстракционно-фотометрическое определение анальгина метиловым зеленым в лекарственных препаратах

Ключевые слова: экстракционно-фотометрический метод, анальгин, метиловый зеленый, основной краситель, лекарственный препарат

Анальгин (1-фенил-2,3-диметил-4-метиламинопиразолон-5-N-метансульфонат натрия) является одним из широко используемых лекарственных препаратов, обладающих противовоспалительным, обезболивающим, жаропонижающим действием [9]. Однако из-за ряда побочных эффектов (агранулоцитоз, гранулоцитопения, аллергические реакции и др.) его применение в чистом виде в последнее время резко сократилось, но в составе многокомпонентных препаратов анальгин используется широко [4]. Сейчас на фармацевтическом рынке имеются около десяти лекарственных препаратов, содержащих анальгин. Состав их весьма разнообразен [3].

Стандартные титриметрические методы определения анальгина [5,13], не претерпевшие изменений за последние годы, не отличаются высокой точностью и экспрессностью. Фотометрические методы [10,14,15] малочувствительны, малоизбирательны.

В последние годы для определения анальгина применяется метод градиентной высокоэффективной жидкостной хроматографии [6], который обеспечивает повышение точности расчета площадей пиков и получение более воспроизводимых результатов анализа. Предложены новые тест-средства (индикаторные полоски, порошки ), которые используют для быстрого обнаружения анальгина. Однако методы малочувствительны, носят визуальный характер [7]. Поэтому требуется разработка более чувствительных методов определения малых количеств анальгина. С этой точки зрения большой интерес представляет экстракционно-фотометрический метод определения с применением основных красителей в качестве реагента.

Ранее нами была разработана методика определения анальгина основными красителями трифенилметанового (ТФМ) ряда – кристаллическим фиолетовым [2], малахитовым зеленым [1], бриллиантовым зеленым [11], фуксином [12].

Данная работа посвящена изучению возможности применения другого представителя ТФМ ряда – метилового зеленого (МеЗ) в качестве реагента для экстракционно-фотометрического определения анальгина. Формула МеЗ:

В отличие от других ТФМ красителей, МеЗ имеет двухзарядный катион. Согласно литературным данным [8] такие красители малореакционноспособны и образуют неэкстрагирующиеся ионные ассоциаты (ИА). С этой точки зрения исследование взаимодействия анальгина с МеЗ представляет большой интерес и впервые изучено в данной работе.

Материал и методы

Раствор анальгина готовили из лекарственного препарата серии 961007 ( 50% раствора в ампуле по 2 мл ) согласно прописи [5]. Рабочие растворы получили разбавлением запасного раствора водой. Раствор красителя готовили растворением навески препарата “ч.д.а.” в воде, затем фильтровали. Оптическую плотность (ОП) экстрактов измеряли на спектрофотометре СФ-16, pH растворов – на потенциометре со стеклянным электродом.

Результаты и обсуждение

С целью установления оптимальных условий образования и экстракции ИА опыты проводили в зависимости от основных факторов. Так, в качестве экстрагентов испытаны хлорпроизводные насыщенных углеводородов, бензол и его гомологи, сложные эфиры уксусной кислоты, а также их бинарные смеси. Опыты показали, что лучшим экстрагентом оказалась смесь дихлорэтана с толуолом (1:2), при которой получается максимальное значение ОП ионного ассоциата и минимальное значение “холостого опыта”. Максимальное светопоглощение экстрактов ИА наблюдается в области длин волн λ = 615-630 нм. Далее измерения проводили при  λ = 626 нм.

Важным фактором, управляющим процессом образования ИА, является концентрация водородных ионов в водном растворе.

Экстракцию проводили в присутствии серной кислоты. Опыты показали, что анальгин практически полностью извлекается из растворов с pH 1 по H₂SO₄. При повышении pH растворов извлекается также МеЗ в виде простой соли красителя. В результате ОП “холостого опыта” (А_хол) увеличивается, дифференциальное значение ОП ИА уменьшается, а при pH 1 А_хол = 0. Поэтому в дальнейшем опыты проводили при pH 1 (рис. 1). В качестве раствора сравнения использовали смесь растворителей.

Рис. 1. Зависимость оптической плотности экстрактов ионного ассоциата  анальгина с метиловым зеленым от кислотности водной фазы: 

1– ионный ассоциат, 2 – “холостой опыт”

Исследована также зависимость ОП экстракта ИА от концентрации МеЗ. Максимальное и постоянное значение ОП экстракта получается в присутствии 5.18·10-4 – 1.04·10-3 М красителя. Экстракционное равновесие устанавливается за 30 сек. Окрашенные экстракты устойчивы в течение 1.5 часов. Методом повторной экстракции определен фактор извлечения; R = 0.96. ИА извлекается однократной экстракцией.

Подчиняемость основному закону фотометрии наблюдается в интервале концентрации анальгина 1.0-25.0 мкг/мл. На основании данных калибровочного графика было рассчитано среднее значение молярного коэффициента погашения Е₆₂₆ = 26 300 л·моль^-1·см^-1.

Мольное отношение катиона МеЗ к аниону анальгина определено спектрофотометрическими методами прямой линии Асмуса и сдвига равновесия. В первом методе составу ИА соответствует значение n, при котором функция прямолинейна. Прямолинейная зависимость соблюдается при n=1 (рис. 2а). Во втором случае состав ИА находят по тангенсу угла (б) – наклона прямой к оси абсцисс. Нами установлено, что tgб = 1(рис. 2б). Таким образом, можно утверждать, что мольное отношение компонентов в ИА составляет 1:1.

а                                                            б

 Рис. 2. Определение мольного отношения  катиона МеЗ и аниона анальгина в ИА методами прямой линии Асмуса (а) и сдвига равновесия (б)

Несмотря на то, что исходная форма катиона красителя двухзарядная, в состав ИА входит его однозарядный ион. Это объясняется тем, что экстракция осуществляется при низкой кислотности водной фазы, где краситель переходит в реакционноспособную однозарядную форму. состав ИА можно представить так: [МеЗ]+[An]^–.

Разработанная нами методика применена для определения анальгина в некоторых лекарственных препаратах. 

Определение анальгина в бенальгине, темпалгине, баралгетасе и спазмалгоне

В стакан ёмкостью 100 мл помещают точную навеску порошка растертых в агатовой ступке таблеток (1шт.) перечисленных выше лекарственных препаратов1, растворяют примерно в 35-40 мл воды, встряхивают до растворения препаратов, затем фильтруют через сухой фильтр в мерную колбу ёмкостью 50 мл и доводят до метки водой (раствор А). Исходные растворы разбавляют в 10 раз (раствор Б). В делительной воронке к аликвотной части раствора Б приливают 2 мл H₂SO₄ pH 1, 0.3 мл 0.1% раствора МеЗ, 2 мл смеси дихлорэтана с толуолом (1:2). После минутного встряхивания разделяют и измеряют ОП экстрактов на спектрофотометре СФ-16 при длине волны λ= 626 нм, b = 0.1 см.

Так как лекарственные препараты по ГОСТу содержат другие органические вещества, влияние которых не установлено, правильность результатов анализа проверена методом добавок. Статистическая обработка результатов приведена в таблице.

Таблица

Определение анальгина в лекарственных препаратах

( p=0.95, n=5, tб=2.78 )

 Из таблицы следует,что сопутствующие анальгину органические вещества в случае бенальгина и темпалгина не мешают определению анальгина, а в случае баралгетаса и спазмалгона мешают, получаем заниженные результаты².

Содержание анальгина в лекарственных препаратах находят по калибровочному графику, построенному по фармакопейному анальгину.

Содержание анальгина в одной таблетке определяют по формуле:

где а – количество анальгина, найденного по калибровочному графику;  V – общий объем лекарственного препарата (с учетом разбавления);V₁  – аликвотная часть раствора;  – навеска одной таблетки.

Разработанный метод менее чувствителен, чем методы с кристаллическим фиолетовым и малахитовым зеленым, но более чувствителен, чем с бриллиантовым зеленым и фуксином.

Литература

1. Арстамян Ж.М., Мкртчян М.А. Ученые записки, 2006, 3, с. 67-70.
2. Арстамян Ж.М., Мкртчян М.А. Хим. журнал Армении, 2006, т. 59, 1, с.64-67.
3. Власова И.В., Калеева Е.А., Поморцева А.В. Тезисы VII конференции “Аналитика Сибири и Дальнего Востока”. Новосибирск, 11-16 октября, 2004, с.21.
4. Голубицкий Г.Б., Костарной А.В., Будко Е.В., Иванов В.М., Басова Е.М. ЖАХ, 2006, т.61, 10, с. 1081-1085.
5. Государственная фармакопея СССР, М., 1968, с. 94-95.
6. Костарной А.В., Голубицкий Г.Б., Басова Е.М., Будко Е.В.,Иванов В.М. ЖАХ, 2008, т. 63, 6, с. 566-580.
7. Логинова Л.П., Коновалова О.Ю. Вестник ХНУ, 2007, сер. хим. N 770, вып. 15 (38), с. 90-94.
8. Ломоносов С.А. ЖАХ, 1967, т. 22, 8, с. 1125-1141.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд. 13, 1997, т.1, с.159-162.
10. Методы анализа лекарств. (Максютина Н.П., Каган Ф.Е., Куриченко Л.А. и др.) Киев, 1984, с. 47, 48, 174.
11. Мкртчян М.А. Информационные технологии и управление, 2006, 4-1, с.84-87.
12. Мкртчян М.А., Арстамян Ж.М. Ученые записки, 2009, 3, с. 54-57.
13. Харкевич Д.А. Фармакология. 1993, М., с. 168-171.
14. Hiskey C.F., Young J.G. Analyt. chem., 1951, 23, p. 1196-1198.
15. Svehla G. Talanta, 1966, 13, p. 641-644.

Вопросы, ответы, комментарии