Экстракционно-спектрофотометрическое определение ампициллина акридиновым красителем акидиновым желтым

Натриевая соль 6-[-Д(-)-α-аминофенилацетамидо]-пенициллиновой кислоты. Порошок белого цвета, горького вкуса. Легко растворима в воде, растворима в спирте. Гигроскопичен.

Натриевая соль ампициллина

Применяется для внутримышечного и внутривeнного введения. Этот препарат в своей молекуле содержит β-лактамное кольцо, поэтому объе-диняется в одну группу β-лактамных антибиотиков. Активен в отношении граммположительных микрорганизмов, кроме того, действует на ряд граммотрицательных микрорганизмов, и поэтому рассматривается как антибиотик широкого спектра и применяется при смешанных инфекциях. Препарат применяется при лечении больных пневмонии, хронических бронхитах, абсцессе легких, ангине, перетонините, эффективен при инфек-циях почек и мочевыводящих путей. Как видно, масштабы потребления этого антибиотика привел к разработке новых экспрессных методов определения ампициллина, одним из которых является экстракционно-спектрофотометрический метод с применением использованием красителей различного класса, содержащих различные гетероатомы в молекуле. 

Ранее нами была показана возможность определения микрограм-мовых количеств ампициллина оксазиновым красителем нильским синим “Б” [1] и диазиновым красителем-сафранином “Т” [2].

Настоящее исследование посвящено разработке нового экстракцион-но-спектрофотометрического метода определения малых количеств антибиотика – ампициллина органическим основным красителем акридиного ряда акридиновым желтым, который для этой цели применяется нами впервые. 

Формула красителя акридиного желтого.

Экспериментальная часть.

Запасной раствор ампициллина готовили растворением точной навески из лекарственного препарата производста фирмы ОАО “Киевмед-препарат” (Украина).

Рабочие растворы готовили ежедневно разбавлением запасного раствора дистиллированной водой. Раствор красителя (АЖ) готовили растворением точной навески (0.1%) – реагента – красителя (квалификации ч.д.а.) в дистиллированной воде и отфильтровали. Органические растворители (квалификации х.ч. и ч.д.а.) использовались без дополнительной очистки. 

Кислотность реакционной среды регулировали добавлением соответству-ющего количества соляной кислоты необходимой концентрации (Фиксанал 0.1 г/ экв HCI). Равновесные значения pH водных фаз контролировали при помощи pH-метра pH-121. Оптическую плотность (ОП) водных растворов и органических экстрактов измеряли на спектрофотометре СФ–16. Предвари-тельными опытами было установлено, что ампициллин с катионом красителя АЖ образует ионный ассоциат (ИА) желтого цвета. Были исследованы оптимальные условия образования и экстракции ИА. Так в качестве растворителя испытаны предельные углеводороды, бензол и его гомологи, хлорпроизводние насыщенных углеводородов, сложные эфиры уксусной кислоты, а также их бинарные смеси. Для извлечения образующегося ИА наиболее эффективным экстрагентом оказался этилацетат (Ахол=0,001), который обеспечивает максимальное извлечение ИА и минимальное - ,,холостого’’ опыта. Объемное соотношение водной и органической фаз составляет 2:1 (10мл+5мл). Были сняты спектры светапоглощения этилацетатных органических экстрактов образующегося ИА и ,,холостого’’ опыта, а также водных растворов красителя. Во всех трех случаях максимум светопоглощения наблюдается при одной и той же длине вольны λmax=447,5 нм. При установлении оптимальной кислотности водной фазы опыты проводили в широком интервале кислотности: pH 1,0-4,0 и 0.5-1,0моль/л по HCI растворов, установлено, что ампициллин практически полностью извлекается однократной экстракцией из pH 1,0 по HCI в присутствии 1,0-1,2 мл 0,1% раствора АЖ. Образующийся ИА переходит из водной фазы в органическую при одноминутном встряхивании. Методом повторной экстракции был определен фактор извлечения (R=97%). Окрашенные экстракты устойчивы в течении 60 минут. Диапазон определяемой концентрации ампициллина составляет 1.0-5.0мл/10 мл водной фазы Самп=5,37•10-4 М. На основании данных калибровичного графика было рассчитано среднее значение молярного коэффициента погащения λ447,5 = 160 л. мол-1 см-1. Методом прямой линии Асмуса [3] установлено, что мольное соотношение катиона красителя АЖ к аниону ампициллина в ИА равно 1:1. Рекцию взаимодействия и образования ИА можно представить так:

RCI+AampNa= R+Aamp- + NaCI

где RCI молекула АЖ.

Таким образом, акридиновые красители содержат гетероциклическое ядро, образованное за счет азотного мостика. Атом азота увеличивает интенсивность окраски красителей. Акридиновые красители явлются произ-водными акридина и имеют основные свойства. Многие синтетические производные акридина являются антисептиками, а некоторые из них обладают биологический активностью. 

Разработанная методика имеет низкую чувствительность, однако обеспечивает воспроизводимые результаты, что характерно для акридиновых красителей.

Литература

1. Геокчян Н.О., Микаелян Дж.А., Егиазарян А.А., Хачатрян А.Г.. Экстракцонно-абсобциомет-рическое определение ампициллина оксазиновым красителем нильским синым ‘’Б’’. Ученые записки ЕГУ, 2002, №3 с. 61-65.
2. Геокчян Н.О.Диазиновый краситель – сафранин ‘’Т’’- как реагент для определения ампи-циллина экстракционно спектрофотометрическим методoм. ‘’Вестник хирургии Армении им. Г.С. Тамазяна‘’. 2010, №1 (70), с. 65-68.
3. Булатов М. И., Калинкин` И.П. Практическое руководство по фотоколориметрическим и спектрофотометрическим методом анализа. Л. Химия,1976, с. 219-220

Вопросы, ответы, комментарии