Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

Медицинская наука Армении 3.2008

Специфика нарушений фракционного состава фосфолипидов в мембранах лимфоцитов при экспериментальном туберкулезном воспалении легких (Теоретическая и профилактическая медицина)

Ключевые слова:  туберкулезное воспаление легких, мембраны лимфоцитов, фосфолипиды, нейтральные фосфолипиды, кислые фосфолипиды, фосфатидилхолины, лизофосфатидилхолины, фосфолипаза А2

Согласно научной информации последних лет [1-6], лизофосфатидилхолины (ЛФХ) выступают в роли мощных индукторов интерферона не только в крови, но и, особенно, в мозговой ткани, свидетельствуя тем самым о своем непосредственном участии в инициации, становлении и генерализации иммунологической активности организма [8,10-13,16-18]. Прямым подтверждением высказанных соображений являются результаты исследований по экспериментальному аллоксановому диабету. Согласно многочисленным наблюдениям прослеживается параллелизм в однонаправленности количественных сдвигов как в цельной крови, так и мембранах элементов крови ЛФХ и иммуноглобулинов определенных категорий. Эти и ряд других наблюдений [7,14,15,19,20,28-30,33,37,40,41] подтвердили факт многократного повышения содержания ЛФХ в различных биологических системах диабетогенных животных и послужили основанием к осуществлению настоящего специального исследования в направлении изучения особенностей качественно-количественных сдвигов всего спектра фосфолипидов (ФЛ) на уровне мембран лимфоцитов (МЛ) селезенки, имеющих прямое отношение к иммунитетформирующим системам и, следовательно, активному участию в обеспечении компенсаторно-приспособительных (защитных) механизмов как нормально, так и особенно патологически функционирующего организма. Отмеченное, в частности, касается и иммунологических срывов при туберкулезном воспалении легких в клинике и эксперименте [24-26,35,36].

 

Материал и методы

 

Исследования проводили на 36 морских свинках 2-месячного возраста, массой 250-300 г, зараженных культурой МБТ штамма Н37 в дозе 0,0001 мг путем подкожной инъекции в паховую область. Эвтаназию животных производили на 30-й день после моделирования туберкулезного воспаления легких под гексаналовым наркозом. Лимфоциты селезенки отделяли центрифугированием клеточной суспензии в градиенте плотности фикол-400-верографин-12 и инкубировали в количестве 107 мл при 37оС в 0,01 М растворе трис-HCL буфера с pH 7,4 в смеси со средой 199 (в соотношении 1:4) в присутствии митогена конканавалина А (6 мкг/мл). МЛ, освобождавшиеся после осмотического шока, осаждали повторным центрифугированием и использовали на предмет определения в них ФЛ после предварительного обезвоживания их путем получения ацетоновых порошков. С отмеченной целью производилась трехкратная обработка свежеполученных МЛ в фарфоровой ступке 3-4 мл концентрированного ацетона при тщательном растирании образовавшейся суспензии пестиком и высушивании ее в вытяжном шкафу или под током газообразного азота [22]. Экстракцию ФЛ из исследуемого ацетонового порошка производили по Фолчу [39], используя в качестве экстрагента хлороформ-метаноловую смесь в объемных соотношениях 2:1. Соблюдение указанной пропорциональности компонентов использованной смеси имеет исключительно важное значение в целях достижения максимального экстрагирования ФЛ из первоисточника. Обезвоживание последнего в виде отмеченных выше ацетоновых порошков является принципиально важным условием в соблюдении указанных концентраций составляющих экстрагента и достигается полным удалением водной среды объекта исследования. Фракционирование индивидуальных представителей ФЛ из общего экстракта этих соединений достигалось методом одномерной восходящей хроматографии на тонком слое силикагеля, предварительно нанесенного на стеклянную поверхность (20х20 см) и активированного соответствующим образом, согласно указанной методике, с использованием системы растворителей: хлороформ – метанол – аммиак в объемных соотношениях 65:35:5. Количество ФЛ выражали в мкг липидного фосфора, получаемого в результате минерализации высушенных в эксикаторе или вытяжном шкафу экстрактов ФЛ индивидуальных фракций, снятых с хроматограмм (путем соскабливания пятен ФЛ с силикагелем, окрашенным в желтый цвет после предварительного помещения пластинок в среду, насыщенную парами йода в смеси концентрированных серной и азотной кислот при 180-200оС).

 

Результаты и обсуждение 

 

Как вытекает из приведенного в таблице демонстрационного материала, 30-й день развития туберкулезного воспаления легких у подопытных животных характеризуется значительным (21,8 %) возрастанием количественного содержания общей суммы всех ФЛ (СФЛ) в МЛ, что обеспечивается за счет чувствительного увеличения в них (64,8 %) суммы кислых ФЛ (СКФЛ): монофосфоинозитидов (МФИ), фосфатидилсеринов (ФС), фосфатидных кислот (ФК) и кардиолипинов (КЛ), наделенных, согласно укоренившимся в настоящее время представлениям [9], высоким стимулирующим воздействием на интенсивность течения дыхательных процессов на уровне субклеточных образований и в целом на общеорганизменном уровне. 

 

Таблица

Качественно-количественные изменения фосфолипидов в мкг липидного фосфора/г ацетоновых порошков мембран лимфоцитов крови морской свинки в норме (контроль) и на 30-й день моделирования туберкулезного воспаления легких

Примечание. n = 36; отклонения в величине показателей индивидуальных фракций ФЛ, СНФЛ, СКФЛ, СФЛ, а также К СНФЛ/СКФЛ статистически достоверны, величины P колеблются в пределах 0,001-0,01

 

Отмеченные изменения в качественно-количественном составе индивидуальных представителей КФЛ сопровождаются с несколько специфичными отклонениями фракционного спектра и нейтральных (НФЛ), а также их суммы (СНФЛ), слагающейся из количественного содержания лизофосфатидилхолинов (ЛФХ), сфингомиелинов (СФМ), фосфатидилхолинов (ФХ) и фосфатидилэтаноламинов (ФЭ). Примечательно, что все они за исключением ЛФХ убывали в своем количестве статистически достоверно по сравнению с контролем. Что касается ЛФХ, то на фоне ярко выраженного туберкулезного воспаления легких их содержание претерпевало более чем пятикратное возрастание (574,7 %) при сопоставлении с нормой при одновременно регистрируемой противоположной направленности сдвигов уровней СФМ (44,3 %), ФХ (64,6 %) и ФЭ (44,6 %). Неоднократно наблюдавшийся диссонанс в количественных изменениях отдельных представителей НФЛ, обусловленный ярко выраженным увеличением уровня ЛФХ, служит поводом для серьезных раздумий в плане осмысления роли указанных соединений в формировании соответствующих патобиохимических механизмов, определяющих суть молекулярно-биологических отклонений, лежащих в основе этиологии различных болезненных состояний организма [21], в том числе и при его поражении туберкулезным процессом. На основании многочисленных ранее проведенных наблюдений сложилось четкое представление о мембранотоксическом мембранолитическом действии сверхвысоких концентраций ЛФХ, что по существу воспринимается как факт неукоснительного участия этих соединений при различных заболеваниях в качестве серьезных патогенетических факторов. Со всей очевидностью последнее воспринимается как проявление серьезного тревожного сигнала, свидетельствующего о чрезмерном повышении активности фосфолипазы А2, катализирующей реакцию деацилирования ФХ с образованием ЛФХ, свободных жирных кислот полиенового ряда, вовлекающихся в значительном количестве в реакции свободнорадикального окисления с образованием продуктов переокисления токсического действия. Вместе с тем известно и о благотворном влиянии умеренно завышенных концентраций ЛФХ, слегка доминирующих над верхними границами нормы, в поддержании физиологически запрограммированных норм клеточной активности, в частности в иммунитетстимулирующих превращениях, как частное проявление одной из многочисленных компенсаторно-приспособительных реакций организма. Указанной категории лизопроизводных ФЛ в последнее время поистине придается исключительно важное значение как в общебиологическом, так и патофизиологическом понимании, о чем свидетельствуют материалы Годичной сессии Нью-Йоркской Академии наук 2002 г. [38]. Однако по сей день остается исключительно проблематичным истинный молекулярно-биологический и биохимический механизм вовлечения ЛФХ в регуляторные и патогенетические системы нормально функционирующего организма при его экстремальных и болезненных состояниях, в частности при туберкулезном воспалении легких.

 

Согласно результатам проведенных исследований, диссонанс в направленности количественных изменений СНФЛ и СКФЛ в МЛ селезенки морских свинок, страдающих туберкулезным воспалением легких, серьезным образом отражается и на коэффициенте (К) отношения СНФЛ к СКФЛ (К СНФЛ/СКФЛ), в значительной степени понижающемся (40,2 %) в МЛ больных животных. Этот сдвиг расценивается как отчетливое подтверждение имеющего место чувствительного расстройства постоянства филогенетически стабилизированного в норме постоянства ФЛ-ФЛ соотношений как важнейшего залога в физиологически обусловленной перманентности участия отдельных категорий ФЛ в регуляторных механизмах различных биологических систем организма. Они, прежде всего, обусловлены интенсивно протекающими взаимосвязанными и взаимообусловленными контактами между мембраносвязанными ФЛ и протеинами преимущественно ферментной природы. Значение последних не подлежит переоценке, поскольку издавна сформировалась неоспоримая точка зрения о незыблемости постоянства физиологических уровней ФЛ-ФЛ соотношений, ответственных за обеспечение норм клеточной активности и организма в целом [31,32].

 

В завершение считаем правомерным подчеркнуть факт получения принципиально новой научной информации относительно особенностей качественно-количественных расстройств различных категорий ФЛ в МЛ морских свинок с моделированным у них туберкулезным воспалением легких. Они согласуются с результатами ранее проведенных исследований, касающихся особенностей нарушений метаболизма ФЛ и процессов перекисеобразования при туберкулезном воспалении легких в клинике и эксперименте [23,27,34] и терапевтической эффективности вновь разработанных методов комбинированной антиоксидантотерапии. Последние служат недвусмысленным стимулом к поиску и изысканию новых, наиболее результативных средств антитуберкулезного значения.

 

Литература

 

  1. Агабалян А.С., Давтян О.Я., Багдасарян А.А. и др. Влияние кальциевых форм РНК на развитие опухолевого процесса, ДНАН РА, 1989, т.88, 1, с.31-34.
  2. Агабалян А.С, Рухкян Л.А., Захарян Р.А. Подавление размножения ретровируса MuLV препаратами Ca-дс-РНК и Ca-низкомолекулярной РНК из дрожжей, ДНАН РА, 1989, т.88, 2, с.93-96.
  3. Агабалян А.С., Назаров Л.У., Базиян А.Р.и др. Дс-РНК как фактор, стимулирующий регенеративные и репаративные процессы в раневых тканях, ДНАН РА, 1993, т.94, 3, с.173-177. 
  4. Агабалян А.С. Агавелян А.М., Давтян О.Я. и др. Применение низкомолекулярной РНК для профилактики послеоперационных осложнений, ДНАН РА, 1997, т.98, 2, с.166-169.
  5. Агабалян А.С., Туманян М.А., Захарян Р.А. Стимуляция восстановительных процессов при экспериментальном гепатите, ДНАН РА, 1998, т.98, 4, с.363-365.
  6. Агабалян А.С., Агавелян А.М., Казарян А.В. К вопросу профилактики развития послеоперационных рецидивов и метастазов у больных колоректальным раком, Сб. науч. трудов, посв. 70-летию ЕрГМУ, Ереван, 2000, с.59-61.
  7. Бдоян О.К., Едоян Л.В., Казарян А.В., Карагезян К.Г. Особенности качественно-количественных изменений фосфолипидов в эритроцитарной массе и мембранах эритроцитов белых крыс с инсулиновой гипогликемией, Мед. наука Армении НАН РА, 2006, т. ХLVI, 1, с.44-47.
  8. Бергельсон Л.Д., Дятловицкая Э.В. Итоги науки и техники. Серия “Иммунология”, М., 1988, т.22, с.6-21.
  9. Бурлакова Е.Б. Вестник РАН, 1994, т.64, 5, с.425-431.
  10. Дятловицкая Э.В. Влияние ганглиозидов плаценты на бласттрансформацию и Т-супрессорную активность лимфоцитов человека, Иммунология, 1990, т.14, 1, с.27-79.
  11. Дятловицкая Э.В. Ганглиозиды GM3 и GD3 в опухолях желудка и молочной железы человека, Биохимия, 1991, т.56, 4, с.560-564.
  12. Дятловицкая Э.В. Сфинголипиды и злокачественный рост, Биохимия, 1995, т.60, 6, с.843-850.
  13. Дятловицкая Э.В., Андреасян Г.О., Малых Я.Н., Рылова С.Н. Шеддинг ганглиозидов и изменение биосинтеза церамидов в опухолях яичника человека, Биохимия, 1997, т. 62, 4, с.651-656. 
  14. Едоян А.Р. Специфика корригирующего действия сверхнизких доз факторов химической и физической природы при нарушениях метаболизма фосфолипидов у белых крыс с моделированным аллоксаном сахарным диабетом. Автореф. дис... канд. биол. наук. Ереван, 2004, 21 с.
  15. Едоян Л.В. Качественно-количественные нарушения фосфолипидов субклеточных образований гепатоцитов аллоксандиабетических белых крыс и корригирующее действие сверхнизких доз факторов химической и физической природы. Автореф. дис... канд. биол. наук, Ереван, 2004, 21 с.
  16. 3ахарян Р.А., Месропян Н.П., Мовсесян А.В., Агабалян А.С, Акопян Ж.И. Противоопухолевая активность Ca-двуспиральной РНК из нуклеината натрия, Экспериментальная онкология, 1985, 3, с.54-56.
  17. Захарян Р.А., Казарян П.А., Агабалян А.С., Карагезян К.Г. Стимуляция Са2+-дс-РНК синтеза цАМФ и ингибирование транскрипции гена “myc” в клетках лимфосаркомы Плиссе, ДНАН РА, 1997, т.97, 1, с.63-66.
  18. Захарян Р.А., Рычков Г.Е., Дадалян С.С. и др. Действие двухцепочечной РНК на мембранные процессы пейсмекерного нейрона, Нейрохимия РАН и НАН РА, 1998, т.5, 3, с.239-246.
  19. Казарян А.В. Особенности структурных изменений фосфолипидов головного мозга белых крыс с сахарным диабетом, моделированным аллоксаном, Изд. Международной конференции “Ломоносов, 2005”, М., 2005, с.437-439.
  20. Казарян А.В., Овакимян С.С., Секоян Э.С., Карагезян К.Г. Особенности антикоагулянтных свойств вновь синтезированных препаратов кумаринового ряда, ДНАН, Ереван, 2006, т.106, 1, с.72-79.
  21. Казарян А.В. Особенности нарушений фосфолипидного обмена, процессов свободнорадикального окисления, свертываемости крови и эффективность механизмов их корригирования при моделированном аллоксаном сахарном диабете.  Автореф. дис., Ереван 2006, с. 21
  22. Карян Ш.С. Этиопатогенетические особенности срывов антирадикальной защиты клетки при моделировании аллоксанового диабета у белых крыс и возможные механизмы их упорядочения. Автореф. дис... канд. биол. наук, Ереван, 2003, 22 с.
  23. Карагезян К.Г. В кн.: Фосфолипиды и их роль в жизнедеятельности организма. Ереван,  1972, 267 с.
  24. Карагезян К.Г., Сафарян М.Д., Карапетян Э.Т., Енгибарян А.А. Способ лечения туберкулеза легких, Авторское свидетельство N1713585, Госкомизобретений СССР по науке и технике, М., 1988.
  25. Карагезян К.Г., Сафарян М.Д., Карапетян Э.Т. Вопр.мед.химии, 1989, 4, с.11-12.
  26. Карагезян К.Г., Сафарян М.Д. Пробл.туб., 1990, 8, с.22-24.
  27. Карагезян К.Г., Погосян А.Ю., Овсепян Л.М. Докл.  РАН, 1994, т.334, 1.
  28. Карагезян К.Г., Мелкумян А.В., Сафарян М.Д., Карагезян М.К. Особенности нарушений обмена фосфолипидов в молекулярных механизмах патогенеза экспериментального туберкулезного воспаления легочной ткани и формирования генерализованного гипоксического синдрома, Вестник хирургии Армении, 1996, 1, с.89-94.
  29. Карагезян К.Г., Бдоян О.К., Казарян А.В., Овакимян С.С. Специфика функциональной активности метаболизма гликогена в биологических системах белых крыс с сахарным диабетом, моделированным аллоксаном, Мед. наука Армении НАН РА, 2006, т. ХLVI, 2, с.64-68.
  30. Карагезян К.Г., Казарян А.В., Едоян Л.В., Овакимян С.С. Молекулярные механизмы антикоагулянтного действия соединений кумариновой природы, ДНАН РА,  2006, т.106, 2, с.47-51.
  31. Крепс Е.М. В кн.: Липиды клеточных мембран. Л., 1981.
  32. Крепс Е.М. В кн.: Фосфолипиды клеточных мембран нервной системы в развитии животного мира, XXII Баховские чтения, Л., 1967.
  33. Мартиросян А.А., Казарян А.В., Секоян Э.С, Карабашян Л.В. и др. Специфика корригирующего действия ультрафиолетового облучения при нарушениях резистентности эритроцитов к перекисному гемолизу у белых крыс с сахарным диабетом, моделированным аллоксаном, Aллергология и иммунология, Афины, 2005, т. 6, 3, с.368.
  34. Сафарян М.Д., Карагезян К.Г. Клин.мед., 1991, 7, с.31-33.
  35. Сафарян М.Д. Взаимосвязь течения туберкулеза легких с состоянием липидного и белкового обмена и клиническая эффективность их корреляции в процессе комплексной химиотерапии, Дис.... докт. мед. наук, М., 1992.
  36. Сафарян М.Д., Карагезян К.Г., Карапетян Э.Т. Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и острой пневмонии. Авторское свидетельство N1617382, Госкомизобретений СССР по науке и технике, М., 1988.
  37. Ghazaryan A.V., Hovsepyan L.M., Karageuzyan K.G. Specifcities of phospholipids’ metabolism in rat brain tissue under the conditions of diabetes mellitus, modulated by alloxan, Iranian Journal of Biochemistry and Molecular Biology, Iran, 2005, p.31.
  38. Goetzl E.J., Lynch K.R. Lysophospholipids and eicosanoids in biology and pathophysiology, Annals of the New-York Academy of Sciences, 2002, v.905, p. 357.
  39. Folch J., Lees M., Sloane-Stane G. A simple method for isolation and purification of total lipids from animal tissues , J. Biol. Chem., 1957, 226, p.497-509.
  40. Karegeuzyan K.G., Ktsoyan Zh.A., Ghazaryan A.V., Elbakyan G.V. et al. Lysophosphatidilcholines of blood as a possible etiopathogenetic factor at familial Mediterranean fever (periodic disease), International Journal on Immunorehabilitation, Athens, 2005, 7, 2, p.102.
  41. Karageuzyan K.G., Ghazaryan A.V., Hovakimyan S.S., Karagyozyan M.K., Bdoyan O.K., Melkumyan A.V. Peculiarities of the physiological activity of newly synthesised preparations of koumarin nature on rat brain tissue thromboplastic activity, International Journal on Immunorehabilitation, Tenerife, 2006, 7, 3, p.114. 

 

* Лаборатория молекулярных основ липидологии Научно-технологического центра органической и фармацевтической химии НАН РА ** Республиканский противотуберкулезный диспансер МЗ РА 

0014, Ереван, пр. Азатутян, 26

Автор. К.Г. Карагезян*, М.Д. Сафарян**, С.С. Овакимян*, Д.А. Арутюнян**, Г.В. Элбакян*, А.Р. Хачатрян*, А.В. Казарян*, О.М. Амирханян* * УДК 616.24-002.5-07:616.153.915
Источник. Медицинская наука Армении 3.2008
Информация. med-practic.com
Авторские права на статью (при отметке другого источника - электронной версии) принадлежат сайту www.med-practic.com
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Преувеличение роли хронического простатита в генезе сексуальных нарушений (Обзоры)

Ключевые слова: хронический простатит, сексуальные нарушения, синдром тревожного ожидания неудачи, коитофобия 

На протяжении нескольких десятилетий дискутируется утрированная взаимосвязь хронического простатита и эрекционной дисфункции. До недавнего времени, пока не был изучен механизм эрекции...

Статьи разное
Характеристика Са2+-связывающих мембранных белков саркоплазматического ретикулума при экспериментальном синдроме длительного раздавливания

Ключевые слова: краш синдром, миокард, кальций

Синдром Биватерса, переименованный впоследствии в краш синдром, или синдром длительного раздавливания (СДР), впервые был описан в 1941 году в научном журнале BMJ после так называемого “лондонского блица” – авиационной бомбежки столицы [1]...

Статьи разное
Противоаритмические свойства препарата Мир.-11

Ключевые слова: экспериментальная аритмия, электрокардиограмма, эксплантаты эмбрионального миокарда

Накопленный опыт поиска новых противоаритмических веществ с очевидностью показывает, что лучше идти по пути целенаправленного сопоставления физико-химических особенностей веществ на каких-либо простых моделях...

Кардиология, ангиология Фармакология
Влияние афобазола и нимодипина на мозговое кровообращение крыс в условиях глобальной преходящей ишемии

Ключевые слова: модель глобальной преходящей ишемии мозга, мозговое кровообращение, афобазол, нимодипин.

Одним из наиболее эффективных путей фармакологического воздействия при цереброваскулярных расстройствах является стимуляция ГАМК-рецепторов мозга...

Неврология Фармакология
Патогенетическая обоснованность применения аторвастатина в комбинации с периндоприлом и лозартаном при нестабильной стенокардии (Клиническая медицина)

Ключевые слова: нестабильная стенокардия, маркеры, синергизм

Нестабильная стенокардия (НС) как проявление острого коронарного синдрома без подъема сегмента ST (ОКСБП ST) остается актуальной проблемой  клинической кардиологии в  связи с достаточно высоким риском осложнений...

Кардиология, ангиология Фармакология
Влияние бисопролола и периндоприла на два типа диастолической сердечной недостаточности

Ключевые слова: диастолическая дисфункция, сердечная недостаточность, жесткость левого желудочка

Нарушение диастолической функции при сохранной систолической приводит к клиническим симптомам сердечной недостаточности (СН) [2-4]. Этот вид  СН часто называют изолированной диастолической СН (ДСН) [1,8]...

Кардиология, ангиология Фармакология
Частота HLA-сенсибилизации у женщин при наличии и отсутствии беременности

Ключевые слова:  HLA-сенсибилизация, антилейкоцитарные антитела, беременность

В изучении проблемы иммунологических взаимоотношений матери и плода при HLA-несовместимости достигнуты немалые успехи, и все же в настоящее время в данной проблеме  имеется много неразрешенных вопросов и разноречивых данных...

Перинатология, акушерство и гинекология
Специфические антибактериальные антитела в сыворотке крови больных периодической болезнью

Ключевые слова:   периодическая болезнь, комменсальная микробиота, специфические антитела, IgG, IgA, адаптивный иммунитет

Периодическая болезнь (ПБ) [FMF, MIM249100] – системное аутовоспалительное заболевание, встречающееся преимущественно у народностей, проживающих в Средиземноморском бассейне...

Системные заболевания
Особенности клинического течения рака щитовидной железы у больных молодого возраста

Ключевые слова: щитовидная железа, рак, молодой возраст, факторы организма и опухоли, прогноз

Рак щитовидной железы (РЩЖ), имея сравнительно небольшой удельный вес (до 2%) в структуре онкологической патологии, относится к наиболее часто развивающимся неопластическим процессам органов эндокринной системы [5,14]...

Онкология Эндокринология
Корреляционный и факторный анализ эмоционально-личностных характеристик: онтогенетические аспекты трансформации

Ключевые слова: эмоционально-личностные характеристики, возрастная трансформация, корреляция, факторный анализ 

Концепция доминирования одного полушария за последние два десятилетия  сменилась представлением о функциональной специализации каждого из них...

Статьи разное
Экология и заболеваемость детского населения кишечными инфекциями в 2-х микрорайонах г. Еревана

Ключевые слова: кишечные инфекции, урбанизация, экологическая среда

В настоящее время весьма актуальным считается изучение влияние экологии, загрязнения окружающей среды на состояние  здоровья детей. Заболеваемость детей как инфекционной этиологии...

Инфекционные болезни Детские болезни
Академику Ю.Т.Алексаняну – 70 лет
Академику Ю.Т.Алексаняну – 70 лет

Исполнилось 70 лет со дня рождения и 45 лет научно-педагогической и общественной деятельности известного ученого в области иммунологии, молекулярной биологии клетки...

Врачи

Notice: Undefined index: HTTP_X_FORWARDED_FOR in /sites/med-practic.com/classes/flud_class.php on line 33

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ